竭诚为您提供优质文档/双击可除酪蛋白的制备实验报告篇一：酪蛋白的制备 生化实验酪蛋白的制备一、目的1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法二、原理牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L酪 蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为 4.7利用等电 点时溶解度最低的原理，将牛乳的 ph 调至 4.7 时，酪蛋白 就沉淀出来用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到 纯酪蛋白三、材料、试剂与器具（一）材料新鲜牛奶（一）试剂1、95%乙醇 1200mL2、无水乙醚 1200mL3、0.2mol/Lph4.7 醋酸——醋酸钠 缓冲液 300ml 先配 A 液与 b 液A液：0. 2mol/L醋酸钠溶液称naAc • 3h2o54・44g，定容 至2000mlb液：0. 2mol/L醋酸溶液，称优纯醋酸（含量大 于 99.8%）12.0g 定容至 1000ml取 A 液 1770ml，b 液 1230ml 混合即得 ph4.7 的醋酸— —醋酸钠缓冲液 3000ml4、 乙醇——乙醚混合液乙醇：乙醚=1： 1 （V/V）（二）器具1、离心机 2、抽滤装置3、精密 ph 试纸或酸度计 4、电炉5、 烧杯 6、温度计四、操作步骤（一）酪蛋白的粗提100mL牛奶加热至40°C。
在搅拌下慢慢加入预热至40°C、 ph4.7的醋酸缓冲液100mL.用精密ph试纸或酸度计调ph至4.7将上述悬浮液冷却至室温离心15分钟（3000r/min） 弃去清液，得酪蛋白粗制品二)酪蛋白的纯化1、 用水洗涤沉淀3次，离心10分钟(3000r/min),弃 去上清液2、 在沉淀中加入 30mL 乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液 转移至布氏漏斗中抽滤用乙醇—乙醚混合液洗沉淀 2 次 最后用乙醚洗沉淀 2 次，抽干3、 将沉淀摊开在表面上，风干；得酪蛋白纯品三) 准确称重，计算含量和得率含量：酪蛋白g/100mL牛乳(g%)式中理论含量为 3.5g/100mL 牛乳五、注意事项1、 由于本法是应用等电点沉淀法来制备蛋白质，故调 节牛奶液的等电点一定要准确最好用酸度计测定2、 精制过程用乙醚是挥发性、有毒的有机溶剂，最好 在通风橱内操作3、 目前市面上出售的牛奶是经加工的奶制品，不是纯 净牛奶，所以计算时应按产品的相应指标计算六、实验报告1、 根据实际操作，以流程图形式总结酪蛋的制备方法2、 合理分析实验所得率七、思考题1、制备高产率纯酪蛋白的关键是什么？2、试设计另一种提取酪蛋白的方法？ 篇二：实验四、酪蛋白的制备 实验四、酪蛋白的制备一、目的1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。
2、掌握等 电点沉淀法提取蛋白质的方法二、原理牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L酪 蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为 4.7利用等电 点时溶解度最低的原理，将牛乳的 ph 调至 4.7 时，酪蛋白 就沉淀出来用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到 纯酪蛋白三、材料、试剂与器具（一）材料新鲜牛奶（一） 试剂1、95%乙醇 1200mL2、无水乙醚 1200mL3、0. 2mol/Lph4.7 醋酸——醋酸钠缓冲液 3000ml 先配 A 液与 b 液A液:0. 2mol/L醋酸钠溶液称naAc?3h2o54.44g，定容 至 2000mlb液：0. 2mol/L醋酸溶液，称优纯醋酸（含量大于 99.8% 用冰醋酸也可以）24.0g定容至2000ml取 A 液 1770ml，b 液 1230ml 混合即得 ph4.7的醋酸一一醋酸钠缓冲液3000ml4、乙醇一一乙醚混 合液乙醇：乙醚=1： 1 （V/V）（二）器具1、离心机 2、抽滤装置 3、精密 ph 试纸或酸度计 4、恒温水浴箱 5、烧杯四、操作步骤（一）酪蛋白的粗提10mL牛奶加热至40°C在搅拌下慢慢加入预热至40°C、 ph4.7的醋酸缓冲液10mL.用精密ph试纸或酸度计调ph至4.7。
将上述悬浮液冷却至室温离心8-10分钟 （3500-4000r/min）弃去清液，得酪蛋白粗制品二）酪 蛋白的纯化1、 用水洗涤沉淀3次，离心5分钟（3500-4000r/min）， 弃去上清液2、 在沉淀中加入 20mL 乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液 转移至布氏漏斗中抽滤用乙醇—乙醚混合液洗沉淀 2 次 最后用乙醚洗沉淀2次，抽干3、将沉淀摊开在表面皿上， 风干；得酪蛋白纯品三）准确称重，计算含量和得率 含量二酪蛋白g/10mL牛乳（g%）得率=1测得含量/理论含量） X100%式中理论含量为3. 5g/100mL牛乳五、注意事项1、 由于本法是应用等电点沉淀法来制备蛋白质，故调 节牛奶液的等电点一定要准确最好用酸度计测定2、 精制过程用乙醚是挥发性、有毒的有机溶剂，最好 在通风橱内操作3、 目前市面上出售的牛奶是经加工的奶制品，不是纯净牛奶，所以计算时应按产品的相应指标计算六、实验报1、根据实际操作，以流程图形式总结酪蛋的制备方法 2、合理分析实验所得率七、思考题1、制备高产率纯酪蛋白的关键是什么？2、试设计另一 种提取酪蛋白的方法？琼州学院实验项目卡 生物科学与技术学院生化实验室设日期___年__月__日 实验教师签名 实验员（管理员签名 篇三：实验酪蛋白的制备实验四酪蛋白的制备一、实验目的1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。
2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法二、实验原理牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L酪 蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为 4.7利用等电 点时溶解度最低的原理，将牛乳的 ph 调至4.7 时，酪蛋白 就沉淀出来用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到 纯酪蛋白三、材料、试剂与仪器1.材料新鲜牛奶2.试剂(1) 95%乙醇 1200mL(2) 无水乙醚 1200mL(3) 0・2mol/Lph4.7醋酸一醋酸钠缓冲液300ml先配A 液与b液A液：0. 2mol/L醋酸钠溶液称naAc • 3h2o54・44g，定容 至 2000mlb液：.2mol/L醋酸溶液，称优纯醋酸(含量大于99. 8%) 12. 0g定容至1000ml取A液1770ml, b液1230ml混合即 得ph4.7的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml4) 乙醇一乙醚混合液乙醇：乙醚=1： 1 (V/V)3. 仪器离心机、抽滤装置、精密 ph 试纸或酸度计、电炉、烧 杯、温度计四、操作步骤1.酪蛋白的粗提100mL牛奶加热至40°C在搅拌下慢慢加入预热至40°C、 ph4.7的醋酸缓冲液100mL.用精密ph试纸或酸度计调ph至4.7。
将上述悬浮液冷却至室温离心15分钟(3000r/min) 弃去清液，得酪蛋白粗制品2.酪蛋白的纯化(1) 用水洗涤沉淀3次，离心10分钟(3000r/min), 弃去上清液2) 在沉淀中加入 30mL 乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊 液转移至布氏漏斗中抽滤用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次 最后用乙醚洗沉淀 2 次，抽干3) 将沉淀摊开在表面上，风干；得酪蛋白纯品3. 准确称重，计算含量和得率含量：酪蛋白g/100mL牛乳(g%)五、 实验结果及分析式中理论含量为 3.5g/100mL 牛乳六、 思考题1、制备高产率纯酪蛋白的关键是什么？。