实验十二:家兔尿生成的调节一、 实验目的1、学习输尿管插管技术2、观察血浆胶体渗透压、血糖浓度、肾小球毛细血管压变化对尿生成的影响3、观察影响肾小管重吸收药物对尿生成的影响二、 试验原理1、尿的生成过程包括:肾小球的滤过作用;肾小管与集合管的重吸收作用;肾小管与集合管的分泌作用在整体内,这三个过程往往受到生理性的调节凡是影响这些过程的因素,都可影响尿的生成而影响尿量的改变2、肾小球的滤过作用:肾小球毛细血管网内血浆成分向肾小球囊腔滤过,是尿生成过程的第一步肾小球的滤过作用主要取决于肾血流量和有效滤过压 肾小球滤过膜的通透性很高, 所产生的肾小球滤液在小分子溶质的组成上非常接近于血浆,只是几乎不含有蛋白质3、肾小管和集合管的重吸收原尿中的 99%在流经集合管和肾小管时被重吸收对于尿的浓缩和稀释有重要意义对各种物质的重吸收有三类: 葡萄糖能完全重吸收; 电解质和水可被吸收大部分; 尿素、肌酐等代谢终产物仅有小部分被重吸收 Cl- 、Na+ 、K+ 离子在肾小管和集合管中大部分被重吸收4、尿生成的调节(1)肾内自身调节肾在肾动脉压发生较大范围变动时可通过肾内部的活动变化量处于相对稳定的状态 (血压 -血流自动调节机制) 。
(肾内因素) 来保持肾血流肾小管中的溶质浓度对小管液渗透压有重要影响水的重吸收,尿量增多 (球 -管平衡)小管中溶质浓度高, 渗透压高, 影响( 2)神经和体液调节肾内有交感神经刺激交感神经可引起肾内血管平滑肌收缩,从而改变肾血流量;肾上腺素和去甲肾上腺素也可促进肾血管收缩抗利尿激素的作用:抗利尿激素是由下丘脑视上核的神经细胞分泌的,经下丘脑 -垂体束至神经垂体, 在适宜刺激下释放到血液中 主要作用是增加远曲小管和集合管对水的重吸收,减少排尿量三、 动物与器材1、家兔2、手术台,常用手术器械,生理记录仪,输尿管插管,注射器,纱布3、20%氨基甲酸乙酯, 10%葡萄糖注射液, 温热生理盐水 (38℃ ),去甲肾上腺素垂体后叶素 (6 单位 /ml) (为垂体后叶水溶性成分提取物,含抗利尿激素和催产素)(1∶ 10000),四、 方法与步骤1、麻醉→背位固定→剪去颈部与下腹部被毛2、分离颈部动脉,做动脉插管→分离右侧迷走神经→穿两线备用→用湿纱布覆盖创面3、下腹部正中线作长约 4 厘米的切口→将膀胱移出腹腔外→分离出一侧输尿管→在近膀胱处穿线结扎,再穿一线备用,在管壁上剪一斜向肾的切口,插入输尿管插管,扎紧固定→直接计算尿流量(滴 /min )。
五、 实验观察待尿流量稳定后,进行以下实验1、 耳缘静脉注射温热生理盐水 30ml,观察尿量的变化2、 耳缘静脉注射 20%葡萄糖 15ml,观察变化3、 耳缘静脉注射肾上腺素 0.5ml ,观察变化4、 耳缘静脉注射垂体后叶素 2 单位,观察变化5、 结扎并剪断右侧颈迷走神经,用中等强度的连续脉冲刺激其外周端 20~30s,观察变化六、 注意事项每项实验开始前, 都应先记录一段作为对照, 然后进行注射或刺激, 并连续记录和观察至效应明显,以及恢复过程七、 实验结果及分析1、正常状态下血压曲线正常血压曲线,此时记录尿液生成量为 6 滴/3min 2、耳缘静脉注射生理盐水 20ml 后血压曲线与正常血压曲线相比可以发现,注射生理盐水后,兔子的血压明显升高,由于静脉注射的生理盐水直接进入血液循环, 加大了兔子体内血量 同时记录的尿生成量为 20 滴/3min ,是正常状态下尿生成量的 3.3 倍由于生理盐水中的 Na、Cl离子被肾小管和集合管完全重吸收了, 同时有一些水分也被重吸收, 所以尿液生成量增大,但增大幅度不是太大3、耳缘静脉注射 20% 葡萄糖 15ml 后血压曲线耳缘静脉注射 20%葡萄糖溶液 15ml,血压曲线有一定的增大趋势, 但增大很微弱。
此时生成尿滴数为 84 滴/3min ,是正常尿滴数( 6 滴/3min )的 14 倍表明注射20%葡萄糖溶液能明显增大尿生成量 由于注射的葡萄糖溶液直接进入血液循环,增大了肾血管的血流量,而肾小管和集合管在机体不缺水时又只重吸收葡萄糖,所以葡萄糖溶液的水分全部渗过肾小管,形成尿液尿液生成量远较生理盐水的提高幅度大, 而血压的影响较生理盐水小, 表明注射葡萄糖在血液中的存留量没有生理盐水的大4、耳缘静脉注射肾上腺素 0.5ml 后血压曲线耳缘静脉注射肾上腺素 0.5ml ,血压曲线有微弱的上升趋势 同时记录尿滴数为 1 滴/3min ,尿生成量适正常状态下的 1/6. 表明肾上腺素,能在一定程度上加强心脏的舒张活动,同时减少尿液的生成量,这是由于肾上腺素能够促进肾血管的收缩,减少肾血管的血量,从而减少了尿的生成量5、耳缘静脉注射垂体后叶素 2 单位后血压曲线耳缘静脉注射垂体后叶素 2 单位,对于血压有稍微的增强作用,但很微弱同时记录的尿液生成量为 0 滴/3min 由于在垂体后叶素中含有抗利尿激素,抗利尿激素进入血液,主要作用是增加远曲小管和集合管对水的重吸收,减少排尿量6、结扎并剪断右侧迷走神经后血压曲线结扎右侧迷走神经,剪断后刺激外周端,血压曲线有一定的下降趋势。
同时记录尿液生成量为 0 滴/3min 迷走神经一定程度的减少血流量,对于排尿量有一定的影响,但影响应该不会这么大,疑为由于试验时间过长,兔子的新陈代谢已经减慢对实验结果造成影响,因为此时的血压水平已经显著低于正常值。