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免疫组化步骤

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免疫组化步骤_第1页
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免疫组化步骤1、 第一次脱蜡 20min2、 第二次脱蜡 20min3、 酒精脱二甲苯,100%酒精3min,95%酒精3min,80%酒精3min,70%酒精3min4、 放入水杯流水冲洗5min5、 转移玻璃杯,蒸馏水泡1min,PBS泡5min6、 转移出来,柠檬酸盐浸泡,微波炉高火至沸腾,再低火20min7、 自然冷却,转移玻璃杯PBS浸泡5min,再浸泡3min8、 H2O2 10min,灭火内源性过氧化物酶9、 PBS浸泡3min,3次10、血清封闭液,37℃水浴20分钟11、37℃孵一抗 90-120min12、PBS洗5min,3次13、二抗孵育20min,37℃14、PBS洗2min,3次15、DAB显色16、苏木精染色苏木精染色步骤:1、 蒸馏水冲洗片子和铜架5秒2、 放入苏木精液染色4min3、 入自来水杯,自来水漂洗2次4、 入饱和碳酸锂20秒5、 入自来水杯,自来水漂洗2次6、 入盐酸酒分色1-2秒7、 立即入自来水杯漂洗3次8、 入饱和碳酸锂20秒9、 入自来水杯,自来水换洗3次10、镜下(10´)观察效果脱水封片步骤:1、梯度酒精:75%酒精1min®80%酒精1min®95%酒精1min®100%酒精1min®100%酒精1min®®二甲苯I 5min®二甲苯II 5min®二甲苯III 5min2、封片,晾干。

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