采用家系重建法鉴定单亲祖孙关系1例摘要目的探讨单亲隔代祖孙关系的鉴定方法 方法提取被鉴定人检材DNA, 通过复合荧光扩增和毛细管电泳得到STR基因座分型分别用ITO法和家系重建 法计算祖孙关系指数对于不能确定的基因型，按最小概率值计算结果家系 重建法计算祖孙亲权指数明显高于ITO法结论 对于单亲隔代亲权鉴定的案例， 尽可能引入更多的家庭成重建家系，以便推断缺失成员的STR基因座分型，从而 计算祖孙亲权指数，以便提供更加明确的鉴定意见关键词：孟德尔遗传定律；STR基因座；家系重建；单亲隔代；祖孙关系1. 案例1.1简要案情江某，女,未婚育有一子一女,现孩子生父因病去世，因继承遗产需要委托我中心 进行祖孙关系鉴定1.2检验方法1.2.1 DNA 提取采用chelex 100法分别抽提祖母、生母、孙子、孙女、大伯、大姑、小姑共7人 口腔拭子DNA1.2.2常染色体STR分型检测采用人类STRtyper-21G扩增荧光检测试剂盒（plus）和STRtyper-23comp常染色 体补充位点试剂盒（宁波海尔施基因科技有限公司）对上述7份口腔拭子提取的 DNA进行复合扩增（扩增体系均为10皿,扩增程序按照相关试剂盒说明书进行，扩 增反应在9700型PCR （美国ABI公司）仪上进行），用ABI-3130XL型基因分析仪 （美国ABI公司）进行毛细管电泳后用GeneMapper ID v3.2软件进行数据分析。
1.2.3 X染色体和Y染色体STR分型检测采用MiroreaderTM 19X Direct ID System试剂盒（阅微基因技术有限公司）检测祖 母与孙女的19个X-STR基因座分型，采用MiroreaderTM 29Y Direct ID System试剂 盒（阅微基因技术有限公司）检测大伯与孙子的29个Y-STR基因座分型按照试 剂盒说明书进行扩增、电泳和结果分析1.3检验结果1.3.1常染色体STR分型结果所检测个体STR分型结果及祖父STR分型推断见表1表1 STR分型结果及祖父STR分型推断1.3.2 X染色体和Y染色体STR分型结果性别染色体STR分型结果见表2、表3表2 Y-STR基因座分型结果1.4数据分析根据性别染色体STR分型结果显示，祖母与孙女的X-STR基因分型均能在祖 母的X-STR基因分型中找到来源，符合孟德尔遗传定律；大伯与孙子的Y-STR基 因分型除了 DYS570基因座之外均一致，考虑突变可能1.4.1 ITO法计算祖孙关系指数采用本实验室使用的中国汉族人群STR基因座分布频率，按照ITO法［1-2］分 别计算祖母与孙子、孙女的祖孙关系指数（HS）LR值。
当检测20个STR基因座时， 祖孙关系指数（HS）LR值分别为1.2485和27334.9880；当加试剂盒至39个STR基 因座时，祖孙关系指数（HS）LR值分别为325.9551和94965.9559结果见表41.4.2家系重建法计算祖孙亲权指数根据家系重建法推断祖父的等位基因或可能的等位基因，按照生物学祖孙关 系鉴定规范［3］采用本实验室使用的中国汉族人群STR基因座分布频率，分别计算 孙子、孙女的祖孙亲权指数（GI值），20个STR基因座累积祖孙亲权指数（CGI 值）分别为7147.1676和920202.2736；当加试剂盒至39个STR基因座时累积祖 孙亲权指数（CGI值）分别为27253706028.0891和3782182867.5743计算结果 见表52. 分析讨论TIO法是基于孟德尔遗传分离定律计算两个个体之间存在亲缘关系机会的方 法，在同胞、祖孙关系鉴定中可以得到较好的应用本案中，采用ITO法分别计 算祖母与孙子、孙女20个STR基因座的祖孙关系指数，LR指分别为1.2485和 27334.9880；当加试剂盒至39个STR基因座时，LR值分别为325.9551和 94965.9559。
参照标准三联体认定亲权关系的PI值，目前业界比较认同的LR阈 值为4000，本例中孙子的LR值未达到认定要求，孙女的LR值达到认定要求根据孟德尔遗传定律，通过比对祖母、大伯、大姑和小姑的基因型可以推断 出祖父的基因型其中 D3S1358、D21S11、D5S818、CSF1PO、Penta D、vWA、 D19S433、D12S391、D6S1043、D2S1338、D1S1656、D13S325、D9S1122、D3S1744、D21S2055、D20S482、D7S3048、D2S441、D19S253、D10S1248、D17S1301、D22-GATA等22个基因座可以确定祖父的基因型，在其余的基因座只 能确定其中一个等位基因在计算祖孙亲权指数时，祖父母传递生父基因的概率及该基因座中生父在祖 父母的4个等位基因中所占的比例本案中，由于祖父的部分基因座等位基因不 确定，故取生父基因在该基因型中所占的最小概率计算其最小累积亲权指数，20 个STR基因座累积祖孙亲权指数（CGI值）分别为7147.1676和920202.2736；当 加试剂盒至39个STR基因座时累积祖孙亲权指数（CGI值）分别为27253706028.0891和3782182867.5743。
根据生物学祖孙关系鉴定规范，累积祖 孙指数大于10000时给出支持意见，累积祖孙指数小于0.0001时给出排除意见 本案中孙子的20个STR基因座累积祖孙指数为7147.1676，无法给出鉴定意见； 但当检测系统增至39个STR基因座时，其累积祖孙亲权指数为 27253706028.0891，达到认定要求孙女的累积祖孙亲权指达到认定要求在复杂亲缘关系中，特别是隔代单亲亲缘关系鉴定，当ITO法无法满足鉴定 需求时，应竟可能引入更多的家庭成员，采用家系重建法给出鉴定意见当检测 系统无法满足鉴定需求时，应增加检测的STR基因座数量以达到检测要求[1] 陆惠玲，杨庆恩.用ITO法计算两个体间的血缘关系机会】J].中国法医学 杂志，2002, 17(3) : 188?191.[2] 赵书民，张素华，等.两个个体间常用亲缘关系机会[J].法医学杂志， 2011, 27(5) : 330?333.[3] 祖孙亲缘关系鉴定规范SF/Z JD0105005-2015作者简介：徐丹丹(1991-)，女，浙江宁波人，法医学学士，主要从事于法医物 证学方向研究。