家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式离体组织灌流方法离体组织灌流方法(了解了解)保证离体器官存活的条件：保证离体器官存活的条件：1.2.1.2.营养营养 3.PH 4.3.PH 4.酸碱度酸碱度 5.5.渗透压渗透压 .目前的离体灌流组织应用：目前的离体灌流组织应用：1.1.家兔家兔 离体小肠离体小肠 2.2.大鼠、小鼠大鼠、小鼠 离体子宫离体子宫 3.3.大鼠大鼠 离体动脉条离体动脉条 4.4.豚鼠豚鼠 离体气管条离体气管条 5.5.蟾蜍、蛙、大鼠蟾蜍、蛙、大鼠 离体心脏离体心脏 .实验原理实验原理消化道平滑肌的一般生理特性：消化道平滑肌的一般生理特性：收缩迟缓：舒缩运动收缩迟缓：舒缩运动 20S/20S/次富有伸展性：伸长可达原来长度富有伸展性：伸长可达原来长度2323倍紧张性：常保持一种微弱的持续收缩状态紧张性：常保持一种微弱的持续收缩状态节律性收缩：离体后于合适环境中仍能节律性收缩节律性收缩：离体后于合适环境中仍能节律性收缩对电刺激不敏感，对化学、机械等刺激敏感对电刺激不敏感，对化学、机械等刺激敏感小肠平滑肌也具有上述生理特性小肠平滑肌也具有上述生理特性2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室4实验原理和背景知识小肠运动受到神经和体液的调节小肠的运动形式小肠的运动形式紧张性收缩紧张性收缩分节运动分节运动蠕动蠕动移行性复合运动（移行性复合运动（MMCMMC）体液调节体液调节:胃肠激素如胃泌素、缩胆囊素、促胰液素等胃肠激素如胃泌素、缩胆囊素、促胰液素等神经调节神经调节:2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室5实验目的实验目的学习哺乳动物类离体小肠平滑肌的制备方法。
学习哺乳动物类离体小肠平滑肌的制备方法观察某些因素（温度、观察某些因素（温度、pHpH值、药物）对小肠平滑肌值、药物）对小肠平滑肌舒缩活动的影响舒缩活动的影响观察哺乳动物小肠的运动形式以及神经和某些药物观察哺乳动物小肠的运动形式以及神经和某些药物对其运动的影响对其运动的影响掌握消化道平滑肌的一般生理特性掌握消化道平滑肌的一般生理特性2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室6实验材料实验材料动物：家兔动物：家兔药品：药品：25%25%氨基甲酸乙酯、台氏液、氨基甲酸乙酯、台氏液、1mol/L 1mol/L 盐酸溶液、盐酸溶液、1mol/L NaOH 1mol/L NaOH溶液、溶液、0.001%0.001%乙酰胆碱溶液、乙酰胆碱溶液、0.001%0.001%去甲肾上腺素溶液、去甲肾上腺素溶液、1%1%氯化钙溶液氯化钙溶液器材：恒温平滑肌实验装置、生物信号采集系统、张力换器材：恒温平滑肌实验装置、生物信号采集系统、张力换 能器、计算机、兔台及手术器械能器、计算机、兔台及手术器械2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室72022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室8实验步骤在体实验在体实验麻醉和固定：称重，计算麻药计量（麻醉和固定：称重，计算麻药计量（4ml/kg4ml/kg的的25%25%氨基甲酸氨基甲酸乙酯），耳缘静脉麻醉，鉴别后固定于兔台上。
乙酯），耳缘静脉麻醉，鉴别后固定于兔台上腹部手术：腹部剪毛、自剑突下沿腹部正中线切开腹壁腹部手术：腹部剪毛、自剑突下沿腹部正中线切开腹壁（10cm10cm）打开腹腔，暴露胃肠道并寻找小肠用皮钳夹）打开腹腔，暴露胃肠道并寻找小肠用皮钳夹住两侧腹壁并提起形成皮兜住两侧腹壁并提起形成皮兜观察：正常小肠的运动形式；局部滴加乙酰胆碱后小肠观察：正常小肠的运动形式；局部滴加乙酰胆碱后小肠的运动形式；局部滴加去甲肾上腺素后小肠的运动形式的运动形式；局部滴加去甲肾上腺素后小肠的运动形式2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室92022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室102022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室11实验方法实验方法离体实验离体实验家兔一只，处死后迅速行腹部手术找出胃幽门与十二指肠交界处，由此取长2030cm的肠管，不留肠系膜取出肠段置于室温台氏液中轻轻漂洗，去除当肠内容物，将肠管分成数段，每段长2-3cm，两端各用系好线的蛙心夹夹住将离体平滑肌连接于设定温度好温度（38）恒温平滑肌槽、张立换能器（书图7-1,p121）上打开电脑和生物信号采集系统2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室12张力换能器张力换能器蛙心夹蛙心夹浴槽浴槽小肠段小肠段13离体小肠收缩曲线代表意义离体小肠收缩曲线代表意义收缩曲线：收缩曲线：-上升支上升支舒张曲线：舒张曲线：-下降支下降支基线上移：紧张性升高基线上移：紧张性升高基线下降：紧张性下降基线下降：紧张性下降幅度增加：收缩力增强幅度增加：收缩力增强幅度减低：收缩力减弱幅度减低：收缩力减弱波峰间距：代表收缩频率波峰间距：代表收缩频率2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室14实验步骤离体实验：离体实验：观察离体小肠平滑肌的正常波形 观察pH 值对小肠平滑肌的作用：浴槽内加1mol/L HCI 溶液2-4滴，观察平滑肌的反应（观察后立即冲洗和更换台氏液）。
2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室15观察项目观察项目离体实验：乙酰胆碱的作用：浴槽内加入0.001%的乙酰胆碱溶液2-4滴，观察平滑肌的反应（观察后立即冲洗和更换台氏液）去甲肾上腺素的作用：浴槽内加入0.001%的去甲肾上腺素溶液2-4滴，观察平滑肌的反应（观察后立即冲洗和更换台氏液）观察温度的影响：分别加入室温台式液、25台式液，观察平滑肌的反应2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室16注意事项1.1.实验过程中必须保证标本的供氧实验过程中必须保证标本的供氧(通气通气)及浴槽内台氏液的恒温及浴槽内台氏液的恒温(38)(38)2.2.灌流浴槽内的液面高度应保持恒定灌流浴槽内的液面高度应保持恒定3.3.放大器零点调好后不要再移动旋钮，以免影响基线放大器零点调好后不要再移动旋钮，以免影响基线上述各药液加入的量系参考数据，效果不明显者可以添加上述各药液加入的量系参考数据，效果不明显者可以添加4.4.每次实验效果明显后立即放掉含药液的台氏液，并冲洗多次，以免平滑每次实验效果明显后立即放掉含药液的台氏液，并冲洗多次，以免平滑肌出现不可逆反应肌出现不可逆反应5.5.每项处理必须有处理标记。
每项处理必须有处理标记2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室17思考题胃肠平滑肌有哪些运动形式以及生理特性本实验药品对小肠平滑肌的作用效果及其机制取肠时为什么采用击昏家兔而不用在麻醉下进行?要保持小肠平滑肌较好的活性，实验过程中要注意什么？制备小肠平滑肌标本时，为什么要取小肠上段，尤其是十二指肠段的平滑肌？2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室18实验结果分析正常正常NaOHHClAchNA氯化钙氯化钙252022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室19实验结果分析加入乙酰胆碱，可见收缩的幅度上升，基线抬高，频率加快消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是钙内流，ACh-M受体结合，使钙通道开放，使肌浆中的钙升高，进而激活肌纤蛋白-肌凝蛋白-ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加故乙酰胆碱对小肠运动有加强作用2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室20实验结果分析加入去甲肾上腺素可见收缩的幅度小，基线下移，频率较慢消化道平滑肌细胞上有 两种受体，NA可作用于受体，使肌膜及肌质网上的钾离子通道开放，钾的外流增加，使膜发生超极化，肠肌兴奋性下降，肌张力下降。
同时，NA还作用于受体，使肠肌膜细胞中的cAMP合成增加，肌膜及肌质网上钙外流增加，也使肌张力下降2022-12-23遵义医学院珠海校区生理机能教研室21实验结果分析加入氯化钙溶液可见小肠平滑肌收缩的幅度增加，基线抬高，频率加快细胞外液中存在较多的钙离子，而钙离子则是肌肉收缩的必要条件平滑肌细胞兴奋肌膜被激活细胞外钙离子进入膜内，而且肌浆网释放钙离子钙离子浓度升高钙离子与钙调蛋白结合肌球蛋白激酶活化ATP分解释放能量横桥获能处于高自由能横桥牵动细肌丝滑动平滑肌收缩。