光合细菌培养基配方光合细菌是兼性厌氧的,不同的光合细菌用的培养基不一样我 现在就在做关于光合细菌的问题,这几中细菌都是常见的细菌,培 养基在许多微生物上后面都有,光合细菌的富集培养基是:NH4Cl0.1g NaHCO3 0.1g KH2PO4 0.02g CH3COONa 0.1-0.5g MgSO4.7HO20.02gNaClO.05-0・2g三生长因子1 ml微量元素溶液1 ml蒸馏 水 97 ml PH7.0生长培养基加氮源(谷氨酸钠)和碳源(乙酸.丙酸.丁酸盐 等)及可.其他菌的分离只要选择不同的培养基就可以选择分离啊光合细菌富集纯化详见网易网盘 光合细菌培养基配方氯化氨 1 克,磷酸氢二钾 0.5 克,氯化镁 0.2 克,氯化钠 2 克, 酵母膏0. 1克,水900毫升 各成份溶解后15磅灭菌20分钟,然后无菌的加入过滤的碳酸氢钠 5.0克/50毫升水;0毫升过滤的乙醇用过滤的0.1N磷酸调PH=7.0 即可响应面设计法优化光合细菌培养基配方培养基成分中醋酸钠 和蛋白胨对于光合细菌的生长影响最为显著,最优培养基配方为: 醋酸钠1・145g/L、蛋白胨0・055g / L、碳酸氢钠0・6g/L、硫 代硫酸钠0・4g/L、氯化钠0・3g/L、硫酸镁0・lg/L、磷酸二氢钾0・05g/L。
在此条件下,光合细菌生长最为良好,经过5d培养以后,培养液 OD600 可以达到 0.5 以上光合细菌(含生产工艺)优良的光合细菌菌种的外观质量是啥样? 一般优良的光合细菌菌种和产品的外观质量有以下几 点:八、、•1、外观上看比较均匀,基本无上下分层 相反,市场上有许多光合细菌是上下分层的,包括我中心初期的产品也是 这样,上层比较清淡,下层则比较深厚,上层颜色浅,下层颜色深, 最底层可能还会有一层黑黑的沉淀而优秀的光合细菌菌种和产品,上下都是比较均匀的,没有 较明显的分层,颜色比较均匀,外观看起来也悦目当然,除了 培养基溶解时,会与硬水中的重金属离子反应产生的絮装沉淀除 外)这种上下无分层,颜色均匀,不是靠加悬浮剂,或增稠剂而 造成的,而是自然培养出来的,不加任何修饰而成的少数地方, 由于水质的原因,可能会产生稍稍的差别2、 没有粘壁现象 很多市场上的产品都有粘壁现象,即在容器的壁上形成一层红紫色的颜色层,就象是油漆一样,洗不掉, 抹不去这主要是在培养过程中形成的,也有在保存过程中形成的优秀的光合细菌菌种和产品,应该是没有一丝一毫的粘壁现 象所以外观上看起来质量也更好3、 颜色的深度比较深。
根据国家质量标准,可以用 721 分 光光度计,测量A660nm处的吸光值,如果大于1.5,则说明,浓度 一般都在30亿/毫升以上,好的光合细菌菌种和产品都在1.5以上4、 颜色鲜艳无杂色 优秀的菌种和产品,不仅颜色深,而且,比较鲜艳,没有杂色,比如是大红色,血红色,或是深紫色, 看起来是很悦目的,没有不良的杂色,或是暗暗的颜色5、 保存期限长 可以保存夏天 3 月以上,冬天 6 月以上在期限内外观基本无变化保持 80%以上的活力6、 培养周期短,接种量少 好的菌种,接种量在 10--20%即可,我中心推崇 20%接种量,培养条件好的,可只用1 0%接种量, 都可以在 3--5 天内培养好(条件是用白炽灯培养, 温度在 30--37 度),或在7 天培养好(条件是用太阳光照培养,阳光充足时,仅 是白天照射培养,液体温度在 30--38 度,晚上不培养)而市场上很多菌种要50%以上接种量,当然,在有条件情况下, 用大接种量是有好处的,在有条件的情况下,我中心也推荐您用 30% 的接种量,能更稳妥,更快地培养成功7、 基本不存在杂菌污染 在保证清洁培养的情况下,一般不存在杂菌污染的情况,当然,这也与培养基配方技术有一定关 系。
8、可以无限制地循环培养下去 不仅可以无限制 地循环培养下去,而且,性能不变,质量不减当然,这也与培养 基配方技术有一定关系小规模光合细菌灯光培养中用 60--100 瓦白炽灯较好在实验室用纸箱法培养光合细菌时,要用到白炽灯 (注意,不能用日光灯,日光灯的光波不适合培养光合细菌,所以 日光灯是没有用的),以前做的试验由于是用500*500*350mm的小 纸箱,所以有40瓦的白炽灯就可以维持箱内温度在35°C左右,甚 至到40C,用40瓦的白炽灯培养,一般需要5天以上才能 长得非 常深红色后来用到了 700*700mm的大纸箱,我们才改用60瓦的白 炽灯,发现培养的时间可以大大缩短了,而且进入冬季后,纸箱中 的温度只能维持到25C,我们 发现,即使是在25C的箱内温度下, 也只要培养4天左右就长得非常深红色了,所以我们分析,可能是 6 0瓦以上的白炽灯的光波更加适合于光合细菌的生长繁 殖,所以 我们建议各位用户,改用60瓦的白炽灯,可以大大提高培养的成 功率,和大大缩短培养的时间如果是夏天,若用60瓦的白炽灯太热,可以在纸箱上戮 大量孔洞,用于散热,维持箱内温度在35度左右光合细菌发生剂的用法(即光合细菌的生产工艺) 一、光合细菌生长所需的营养条件 用“光合细菌发生剂”生产的终端产品:光合细菌液,PSB细胞浓度达到30—100 亿/毫升,生产成本只要0.30元/公斤,而使 用价值可达到2元/ 公斤,投入产出比达到1:6--12以上。
做成的液体产品,密封保 存在通气干燥处,可保质达1年以上二、光合细菌生长所需环境条件 有了营养全面的“光合细菌发生剂”,还必须有一个良好的培养环境条件,才能 生产出优质产品出来PSB所需的环境条件有以下几个: 1:培养介质,含杂菌较少的清洁淡水地下水、河水、海水等, 硬度低的水更好(如河水),选取水源时,最好先做几种水源的对 比试验,使用哪里的水源在培养试验中最先变成红色(生长良好), 就选用哪里的水作为生产用水自来水取自河水,硬度低,杂菌少, 只要菌种能耐漂白粉杀菌剂,用自来水比其它水反而更好更快您 不妨做一次自来水的试验2:酸碱度,PH值在8~8.5为最好,光 合细菌的适应PH范围在6~10之间3:温度,以28~36°C为最适生长温度,其适应的生长温度范围为 15~41°C4:光照强度,以3000~4000勒克斯(LX)为最佳,即每25公斤菌液需要用相当于60瓦左右的白炽灯作光源,而太阳光照为最好且不要成本宜春专利中心提供光合细菌发生剂三、光合细菌成品的生产1、培养液的配制将购得的我中心的光合细菌发生剂取一公斤,放入一个干净的容器中,加入1 0 0公斤水,搅拌均匀, 直到发生剂(培养基)溶化为止。
若容器不够大,则可以少配一 点注意事项:水源一定要选择好,含菌量较低的清洁淡水、海水或加 粗食盐的淡水从经济、实用的角度考虑,地下水(井水)含菌量 低,为最佳水源,另外,若当地 自来水含氯较低,也可用,效果 很好;清洁的地表水也可使用;含氯量较高的自来水应敞口放置两 三天或调PH值至偏碱后使用;蒸馏水及纯净水固然很好,但成本 太 高,可用于提纯菌种选择容器:少量生产可用透明度较高的白色或透明塑料桶、玻璃容 器大量生产可用水泥池、水泥船,也可临时开挖土池,垫上双层 塑料膜防漏防浑浊,培养液的深度为 30公分最佳2、培养方式有以下三种:(1)做小试验培养的方法容器为:1.25 升的饮料瓶,即小规模生产方法,由于饮料瓶的量小, 瓶子透明度好,又密封,所以培养环境好,需要的接种量也少, 比 较简单设备为:光照箱,用一个大的纸箱,放一个 40 瓦的白炽灯悬挂在 箱子的空中(注意防火),纸箱内壁四周,堆放着已装好了培养液 并 接了种的饮料瓶,这样,既达到了保温到 25—40 度的效果,又 达到了光照的效果 较大的箱子要用 60 瓦的白炽灯,一般一个箱 子,可 放这种饮料瓶 8个以上,即一次可生产约10公斤/箱。
灯 泡与瓶子的距离不超过 20 厘米夏天,可撤去纸箱,以防温度过 高,春秋秋 天,也要在纸箱四周钻孔以散热操作规程如下: 配料:培养液为1%浓度的发生剂溶液,接种量为20%,注意水源必 须一干净卫生,最好用地下水,自来水可以试用一下, 第一次做 试验时,要多选择几种水源同时做,以确定哪种水源最好,最先转 成红色的水源最好,可确定为今后的生产用水培养:在箱子内,打开白炽灯,照几天即可,一般可达到温度在35 度,控制在 30--40 度之内,所以要密切注意温度不要过高,第一 次培养可能需要 5天以上,一定要注意,每天要摇晃两次,这很重 要,菌种适应了贵地的水源后,一般只需要 2天即可长成深红色 培养成熟标准:以培养液长成深红色为准,这时一般成品的光合细 菌浓度可达到 30--100 亿/毫升 (2)用塑料桶进行大规模生 产 或用培养虾苗用的塑料袋来做效果更好一袋 20 公斤的样 子例如容器选用 25 公斤装的大塑料桶,由于条件不如做小试验的培 养方法好,所以接种量要达到至少 20%以上的量即往大塑料桶中 加入 22.5 公斤的配制好的培养液(即 1%的培养基溶液),再加入 2.5 公斤的菌种液,摇匀。
①利用太阳能培养 : 把上述塑料桶放到太阳底下晒即可,只要注 意:夏季气温过高,若用太阳作为光照能源,则应采取部分遮阳(用 黑色的遮阳塑料网),通风的降温措施,以防光合细 菌快速老化 死亡;冬天则气温低,则要采取搭建一个塑料暖棚增温的方法,把 塑料桶放入暖棚内晒太阳即可;春秋季则可直接放在太阳底下不用 管即可总之要使之 温度在 25 度--36 度之间最好过些日子它自 然会长成深红色的成品经方法即是懒汉培养工艺法, ②利用白 炽灯作为光能生产:在一个容器内悬挂一个白炽灯,容器内装的培 养液深度不得大于 30公分,灯泡与液面距离不得大于 20公分3)用塑料膜做的池子来大规模生产您还可以这样利用太阳能大规模培养(以培养 2 吨菌液为例):选择阳光充足的地方,开挖一土池(长5米、宽1.8米、深0.4米), 有现成的水泥池更好垫上塑料薄膜,然后再铺上桶状塑料薄膜, 并将其一端密封,从 另一端加入1.8吨配制好的培养液,和0.2 吨的菌种,一共2吨,排尽薄膜中空气后,再将该端密封保持适 当的温度,冬天如果温度过低,搭建透明塑料薄膜棚增温这样, 几天后,菌液培养成熟长成深红色也可以在室外挖一个土坑,深40厘米,垫上 一层塑料薄 膜,再倒入培养液,液面上再盖一层塑料薄膜,以免与大量空气接 触,造成污染杂菌,再用太阳照射培养成熟,天气冷就搭塑料棚升 温。
当然这一套装置也可放于室内,用每半平方料一个60瓦白炽 灯照射,灯与液面距离小于25厘米,温度不够,也要搭一个室内 塑料棚,棚内放一炉火即可保温到 30度以上四、光合细菌固态产品的生产将高浓度PSB菌液用蛭石粉或沸石粉吸附后,阴干或风干粉碎即得粉状固体PSB产品可包装出厂,便于运输和售卖也更象一个产品了一般售价可达到2元/公斤以上,光合细菌:沸石粉=1: 3~4也可用其它载体来 做干燥吸附剂,如草炭、硅藻土等。