实验二实验二 细菌涂(抹)片的制备和革兰氏染色细菌涂(抹)片的制备和革兰氏染色 目的要求:目的要求:1 1、掌握细菌抹片的制备方法和常用染色方法掌握细菌抹片的制备方法和常用染色方法2 2、认识革兰氏染色和抗酸性染色的反应特、认识革兰氏染色和抗酸性染色的反应特性实验内容:实验内容:1 1、细菌抹片的制备:细菌抹片的制备:玻片准备:透明、洁净、无油渍玻片准备:透明、洁净、无油渍抹片:液体材料、非液体材料、组织脏器材料的抹片方法讲解、示范抹片:液体材料、非液体材料、组织脏器材料的抹片方法讲解、示范干燥固定:火焰固定和化学固定的示范讲解其目的及注意事项干燥固定:火焰固定和化学固定的示范讲解其目的及注意事项2 2、细菌涂片的制备:讲解并示范涂片、干燥、固定的方法细菌涂片的制备:讲解并示范涂片、干燥、固定的方法3 3、细菌常用染色方法:细菌常用染色方法:革兰氏染色法革兰氏染色法实验二实验二 细菌涂(抹)片的制备和革兰氏染色细菌涂(抹)片的制备和革兰氏染色 细菌抹片细菌抹片 的制备的制备实验二:细菌涂片的制备和染色镜检实验二:细菌涂片的制备和染色镜检 革兰氏染色法:革兰氏染色法:1.1.制片:取待检病料或细菌培养物常规抹(涂)片、干燥、制片:取待检病料或细菌培养物常规抹(涂)片、干燥、固定。
固定2.2.初染:滴加结晶紫,染色初染:滴加结晶紫,染色1-21-2分钟,水洗分钟,水洗3.3.媒染:用碘液冲去残水,并用碘液覆盖约媒染:用碘液冲去残水,并用碘液覆盖约1 1分钟,水洗分钟,水洗4.4.脱色:用滤纸吸取或甩去载玻片上的残水,将载玻片倾脱色:用滤纸吸取或甩去载玻片上的残水,将载玻片倾斜,在白色背景下,用滴管流加斜,在白色背景下,用滴管流加95%95%乙醇脱色,直至流出的乙醇脱色,直至流出的乙醇无紫色时(乙醇无紫色时(20203030秒),立即水洗秒),立即水洗5.5.复染:用复红液复染约复染:用复红液复染约2 2分钟,水洗分钟,水洗6.6.镜检:用滤纸吸水,干燥后,显微镜油镜观察镜检:用滤纸吸水,干燥后,显微镜油镜观察革兰氏染色法过程示意图革兰氏染色法过程示意图革兰氏染革兰氏染 色法动画色法动画革兰氏革兰氏 染染 色法色法革兰氏染革兰氏染 色法动画色法动画实验报告:实验报告:1 1、细菌抹片或涂片革兰氏染色的显微镜观察结果细菌抹片或涂片革兰氏染色的显微镜观察结果2 2、革兰氏染色法的具体程序和注意事项革兰氏染色法的具体程序和注意事项涂片涂片干燥干燥固定固定染色染色12min水洗、吸干镜检镜检细菌的单染色细菌的单染色细菌抗酸性染色细菌抗酸性染色。