原花青素含量1. 材料和仪器主要试剂:提取液,原花青素标样,盐酸正丁醇溶液、NH4Fe(SO4)2、 95%乙醇主要仪器:UV2100型紫外分光光度计、恒温水浴锅溶液配制:2 %NH4Fe(SO4)2称取3.66g七水合硫酸亚铁固体,溶于 100m l水中后即得95%乙醇 移取5ml的蒸馏水至100ml容量瓶中用无水乙醇定容盐酸正丁醇移5ml浓HCL至100ml容量瓶正丁醇定容2. 实验步骤a.标准曲线的制备:准确称取原花青素标准样品0.010g,用95%乙醇溶 解并定容于10mL容量瓶中,所得浓度为1mg/mL作标样吸取标样 溶液0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3mL分别于25mL 具 塞试管中,加95%乙醇定容为3mL,然后分别加入0.2mL 2 % NH4Fe(SO4)2溶液和6mL盐酸正丁醇(5:95)溶液,盖塞,摇匀,于 微沸的水浴中加热反应40min取出,于冷水中迅速冷却,溶液显红 色,以0mL溶液作为空白对照,于546nm处测定其吸光度采用最 小二乘法作原花青素浓度(C)与吸光度(A )线性回归方程结果见表取得标样体 积(/ml)00.51.01.52.02.53.0对应标样浓 度(mg/ml)测的吸光度 值Ab.样品测定分别精确吸取10mL样品,用95%乙醇定容于50mL容量瓶。
吸取上述样 品待测液3mL 于25mL具塞试管中,按标准曲线制作项下的操作步骤, 依次分别加入0.2mL 2%NH4Fe(SO4)2溶液、6mL盐酸正丁醇溶液根 据标准曲线计算出结果,按其稀释倍数求得各样品中原花青素含量123AAAABBACCBABBBCBCACACCBACCB3.单因素实验1 .料液比:1:6 1;7 1:8 1:9温度 室温 超声波时间10min 乙醇浓度95%2.超声波时间: 10min料液比:1:835%料液比:1:8温度室温3.乙醇浓度温度室温4.正交试验55%n20min 30min 40min乙醇浓度95%75% 95%超声波时间30min(以此类推2...)1为单因素中第1项A为单因素中第1项第2类B为第3类 (如3 C指 乙醇浓度95%)A B C为单因素测定中最优3选项。