第一节结缔组织和肌纤维染色Van Gieson苦味酸酸性复红法（VG法）用途：VG法用于区分胶原纤维和肌纤维原理：酸性复红和苦味酸对这两种纤维都具有较强的亲合力，结果胶原纤维被酸性复红染成红色，肌肉被 苦味酸染成黄色此方法是一种优良的传统方法固定：10%福尔马林切片：4-6微米试剂：Weigert铁苏木精液：A液：苏木精1g,无水酒精100 ml一般配制后需要数周或数月自然氧化，成熟后使用B液：29%三氯化铁水溶液4 ml，蒸馏水95 ml，盐酸1 ml两液分别配制，临用时A、B液等量混合，过滤后使用24h后失去染色能力Van Gieson 液：1%酸性复红水溶液 10 ml苦味酸饱和水溶液 90 ml临用时1 ：9混合过虑后使用Van Gieson苦味酸酸性复红法（VG法）步骤：1. 石蜡切片脱蜡至水2. Weigert 苏木精液 5-10 min3. 充分水洗4. Van Gieson 液 1-5 min5. 95%酒精迅速分化数秒6. 无水酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固结果：胶原纤维呈红色、肌肉、神经胶质、胞浆、红血球呈黄色、细胞核呈黑色或棕蓝色体会与说明：由于酸性复红退色较快，染色结果不能长期保存，一般只能保存3〜6个月。
二Masson三色法试剂：Regaud氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml将苏木精加入蒸馏水内加温溶解，冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用Masson丽春红酸性复红液：丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml0.2%冰醋酸水溶液：冰醋酸0.2 ml,蒸馏水100 ml1%磷钼酸水溶液：磷钼酸lg,蒸馏水100 ml苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g,蒸馏水98 ml,冰醋酸2 ml1%光绿水溶液：光绿1g，蒸馏水100 mlMasson三色法步骤1. 石蜡切片脱蜡至水2. 铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）3. 依次自来水和蒸馏水洗4. 用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min5. 充分水洗，如过染可盐酸酒精分化6. 蒸馏水洗7. 用Masson丽春红酸性复红液5T0min8. 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻9. 1%磷钼酸水溶液分化3-5min10. 不经水洗，直接用苯胺蓝或光绿液染5min11. 以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻12. 95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色（如光绿液染色为绿色），胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞 核黑蓝色。
体会与说明：1•控制好染色步骤2•组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间3. 0.2%冰醋酸水溶液洗，可使色调清晰鲜艳4•磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制，肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维 呈淡粉红色即可弹力纤维染色Schmorl染色法石炭酸-品红液：碱性品红2g，无水酒精50ml，熔化石炭酸25ml，在37°C温箱过夜，冷后过滤Weigert间苯二酚-品红液：碱性品红1g，间苯二酚（Resorcin）晶体2g，蒸馏水100ml在锥形烧瓶内煮沸，加29%三氯化铁水溶液12.5ml搅拌并继续煮沸2-5mine冷后过滤，烘干滤纸及沉淀， 放入烧瓶并加95%酒精100ml在水浴加温至染料全溶解，待冷却后过滤，并补足因加热蒸发的酒精至100ml 最后加浓盐酸2ml摇匀备用弹力纤维Schmorl染色法步骤1. 石蜡切片脱蜡至水2. 石炭酸-品红液37°C染1h,或室温24h3. 70%酒精漂洗4. Weigert间苯二酚-品红液染色20-30min5. 无水酒精分色约1/2h，如染色过度也可改用0.5%盐酸的95%酒精分色6. 流水冲洗后换蒸馏水漂洗。
7. 常规苏木精染核5-10min8. 水洗9. Van Gieson 液复染 3-5min10. 蒸馏水洗11. 酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固结果：弹力纤维蓝黑色，胶原纤维红色，肌纤维黄色，细胞核蓝色弹力和胶原纤维染色法试剂：维多利亚蓝染色液：维多利亚蓝（Victoria blue上海）2.0g，糊精 0.5g，间苯二酚4.0g，蒸馏水 200ml混合后加热煮沸，边煮边搅拌，约5min再将30%三氯化铁水溶液25ml煮沸后加入上述混合液中，继续煮 沸3min，要不断搅拌，搅拌棒上会出现胶样物质然后终止加热，冷却后过滤将滤纸上的物质连同滤纸 放入60C恒温箱中烤干再将烤干的蓝色粉末连同滤纸溶于400ml 70%乙醇中最后加浓盐酸4ml，苯酚 5g，苯酚不能溶解时可略加温溶解放置成熟后使用丽春红S染色液：0.5%丽春红（Ponceaus上海试剂三厂）15ml，加饱和苦味酸水溶液（1.22%） 85ml弹力和胶原纤维染色步骤1. 石蜡切片脱蜡至水2. 70%乙醇洗 2min3. 维多利亚蓝染液中0.5-2h4. 95%乙醇分色数秒钟5. 蒸馏水洗2min6. 丽春红S染液5min7. 无水乙醇冲洗染液2次。
8. 直接在空气中凉干9. 二甲苯透明，中性树胶封固结果：弹力纤维呈蓝绿色，胶原纤维呈红色，背景呈淡黄色注意事项：1•维多利亚蓝液可反复使用，溶液在室温中可保存数年2•维多利亚蓝液用乙醇分色后，要立即在水中浸洗浸洗后显微镜下观察分色程度，分色不够可再用乙醇 分色3. 丽春红S液染色后将切片倾斜用无水乙醇从一侧快速冲洗，稍干燥后立即透明封固，过于干燥会产生黑 色颗粒Verhoeff铁苏木精弹力纤维染色法试剂：Verhoeff铁苏木精液：5%苏木精纯酒精贮存溶液20 ml，10%三氯化铁水溶液8ml，Verhoeff碘溶液8ml临用时按比例配制，混匀后使用Verhoeff碘液：碘2g，蒸馏水100ml2%三氯化铁水溶液：三氯化铁2g，蒸馏水100 ml5%硫代硫酸钠水溶液：硫代硫酸钠5g，蒸馏水100 mlVan Gieson 液：略Verhoeff铁苏木精弹力纤维染色法步骤1. 石蜡脱蜡至水2. 蒸馏水洗3. Verhoeff液15-30min，至颜色呈黑色4. 自来水洗5. 2%三氯化铁水溶液分化10-20秒，至弹力纤维清晰为止6. 自来水洗7. 95%酒精处理2-5min,为了去碘液,使弹力纤维更清晰。
8. 自来水冲洗2-3min9. 5%硫代硫酸钠溶液处理5min10. 充分水洗,再蒸馏水洗11. Van Gieson 液衬染12. 95%酒精迅速分化13. 无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固结果：弹力纤维呈蓝黑色，肌纤维、纤维素、神经胶质呈黄色，胶原纤维呈红色,胞核呈蓝色Gomori's醛复红染色法用途：显示血管壁、肺泡壁及皮肤组织中的弹力纤维为佳组织固定：用Bouin液，AF液或1%福尔马林固定，避免用含铬盐固定液试剂：1. 盐酸性复红0.5g, 70%乙醇99ml，浓盐酸1ml,三聚乙醛（副醛）1ml将复红溶于乙醇内，然后加 入盐酸和三聚乙醛，充分溶解后在室温中放置24-48小时，自然成熟当染液变为紫色即可应用成熟的液 体在4度冰箱内可保存2-3个月2. 橘黄G染液：橘黄G0.5g，磷钨酸2g，95%乙醇100ml3. Lugol's碘液：碘1g，碘化钾2g，蒸馏水100ml先将碘化钾溶于20ml蒸馏水中，再加入碘，完全溶解后将剩余的蒸馏水加入即可使用4. 5%硫代硫酸钠水溶液染色步骤1. 石蜡切片3-5微米，常规脱蜡至水2. Lugol's 碘液 5-10min3. 水洗 2-3min。
4. 5%硫代硫酸钠水溶液脱碘5min5. 流水冲洗3-5min6. 70%乙醇梢洗7. Gomori's醛复红染色液5-10min8. 70%乙醇洗去多余染液至弹力纤维清晰为止9. 水洗 2-3min10. 橘黄G染液10-20秒钟11. 水洗 1-2min12. 常规脱水、透明、中性树胶封固结果：弹力纤维深紫色，黏液紫色（肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、垂体B细胞均能同时着色），背景 不同程度的黄色网状纤维染色法用途：区别肿瘤的性质和来源1•区别血管内皮瘤和血管外皮瘤2•淋巴肉瘤和网状细胞肉瘤3•尤文氏肉瘤与网状细胞肉瘤4•骨异质增生与骨化性纤维瘤5•软骨粘液纤维瘤和粘液肉瘤6•脑膜瘤和星形细胞瘤原理：氨银液被组织吸咐与组织中的蛋白结合，经甲醛还原成黑色的金属银沉积于组织内及表面用氯化 金调色后，再用硫代硫酸钠液洗去未还原的银盐，从而将组织内的网状纤维清晰地显示出来固定：10%福尔马林切片：4-6微米用品：经酸清洁过的玻璃器皿要求用高纯度试剂，溶液要纯净配制好的氨银液可以短期内4°C保存， 一般能保存1W超过时间会失去染色作用Gordon-Sweet 染色法1 • Gordon-Sweet双氨氢氧化银液：10%硝酸银水溶液5ml于锥形量杯内，逐滴加浓氨水并随时摇荡。
硝酸银遇到氨水后立即产生沉淀，当加到 沉淀物被溶解时，再加入3%氢氧化钠水溶液5ml溶液重新产生沉淀，此时再滴加氨水当沉淀恰好溶解 后加蒸馏水至50ml过虑，贮存于棕色瓶中备用2. 核固红液：核固红0.5 g，5%硫酸铝液，100 ml，加热溶解，冷却后过虑Gordon-Sweet染色步骤1. 石蜡切片脱蜡至水2. 酸化高锰酸钾液(0.5% in 3%sulphuric acid) 5 min3. 蒸馏水洗4. 1%草酸漂白2min5. 流水充分冲洗后蒸馏水洗6. 2.5%铁明矶液媒染10 min7. 蒸馏水洗3次8. 双氨氢氧化银液30秒-1 min9. 蒸馏水洗3次10.11.12.10% 甲醛f ormalin in distilled water) 1 min流水充分冲洗后蒸馏水洗0.2%氯化金液调色2 min15.16.17.18.流水充分冲洗核固红液染10-12 min或1%中性红染5min流水冲洗95%、无水酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶圭寸固结果：网状纤维呈黑色，胶原纤维灰红色，核呈红色Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH或PTH法）试剂：0.25%高锰酸钾：高锰酸钾0.25g,蒸馏水100ml。
5%草酸水溶液：草酸5g,蒸馏水100mlMallory's磷钨酸苏木精液：苏木精5g,磷钨酸10g,蒸馏水500ml用部分蒸馏水加热溶解苏木精，用剩余的蒸馏水溶解磷钨酸两种液体完全溶解后，再将冷却后的苏木 精液与磷钨酸液混合贮存棕色瓶内，待自然氧化成熟后使用（数月）Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH或PTH法）步骤1. 石蜡切片脱蜡至水2. 用汞盐固定的组织切片，要用0.5%碘酒精液脱汞，充分水洗再用5%硫代硫酸钠脱碘，最后充分水 洗3. 蒸馏水洗1-2 min4. 0.25高锰酸钾水溶液氧化2-3 min5. 蒸馏水洗1-2 min6. 5%草酸随溶液漂白2-3 min7. 蒸馏水洗2-3 min8. Mallory磷钨酸苏木精溶液染4-12 h9. 95%酒精迅速分化10. 无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固结果：正常心肌、骨骼肌的肌原纤维横纹呈清晰的蓝色，变性肌纤维的颗粒、团块和收缩带呈深蓝色，神经 胶质纤维、纤维素、线粒体、粘液物质等呈深蓝色，间质结缔组织呈浅红色或不着色，胶原纤维、网状纤 维、骨及软骨基等呈粉红色或棕红色，细胞核、弹力纤维呈紫蓝色，有缺血缺氧早期病变的心肌呈紫蓝色 或棕黄色。
第二节脂类物质染色一与染色相关的问题1. 在石蜡包埋组织处理过程中，要用一些有机溶剂，所以石蜡切片不能用于脂类染色，通常用冰冻切片或 炭蜡包埋切片切片厚5〜15微米2•切片选用中性甲醛、钙甲醛或锇酸固定液固定单纯甲醛固定会丢失一些磷质脂类物质不溶于水，易 溶于有机溶剂所以显示脂质时不能用含有有机溶剂的固定液固定二染色与封固三脂类物质染色方法1•锇酸组织块染色法：染色原理利用锇酸作用与脂质形成不溶于酒精二甲苯等的黑色复合物能显示微 小的脂滴2•脂溶性色素染色法苏丹(III、IV和黑B)、尼罗蓝、油红0等此类染料能被适量浓度的有机溶剂溶解, 被溶解的染料又能在脂质内溶解，此类染料在脂质中的溶解度大，在有机溶剂中的溶解度小由于溶解度的 不同,有利于脂类物质着色其染色作用是物理性脂溶作用和吸附作用封固：白明胶20g，蒸馏水50ml，甘油50ml,石炭酸1g明胶加入蒸馏水后加热37°C,明胶溶解后加 入甘油和石炭酸，混均后备用苏丹-皿染色法此法较常用，对各种脂类物质均适用配制：苏丹-皿染液：苏丹-III 0.15g，60-70%酒精100ml，将染料溶于60-70%酒精中，临用前过滤密闭保存苏丹-皿染色步骤1. 冰冻切片5-10微米。
漂于水中或粘贴在载玻片上2. 蒸馏水洗3. Harris 苏木精液 1 min4. 水洗 3-5min5. 蒸馏水洗6. 70%酒精迅速洗，约20-30秒7. 苏丹TII液置于56C温箱内浸染30 min8. 70%酒精分化数秒9. 切片入蒸馏水10. 用滤纸吸干切片上的水分，待干11. 甘油明胶封固结果：脂类物质呈红色，细胞呈蓝色，粘液物质染色第三节糖类过碘酸-Schiff反应(PAS)试剂: 1•过碘酸氧化液过碘酸0.5 g蒸馏水100 ml,冰箱内4°C保存2. Schiff液碱性复红1 g, 1 N盐酸20 ml,偏重亚硫酸钠1g,双蒸水（D.D.W） 200 ml先将200 ml双蒸水煮沸，加入1 g碱性复红，再煮1分钟冷却至50C加入1N盐酸20 ml,待冷至 35C时加入2g偏重亚硫酸钠轻轻摇动溶解，于室温暗处放置24小时，溶液变成淡黄色加入活性炭1〜 1.5g，摇动至无色，过滤于棕色瓶内，封口后4C冰箱保存Schiff PAS反应步骤1. 切片脱蜡至水2. 蒸馏水洗3. 过碘酸氧化液10-20 min4. 充分蒸馏水洗5. Schiff 液 10 min6. 流水冲洗10 min。
7. 苏木精液染3-5 min8. 0.5%盐酸酒精分化9. 流水冲洗5 min10. 酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固结果：糖原及其他PAS反应物质呈红色,细胞核蓝色粘液染色粘液胭脂红染色法（Southgate粘液）用途：用于各种上皮细胞和结缔组织分泌产生的粘液染色，粘液胭脂红技术在判断原发肿瘤的位置也很有 价值，在不含产生粘液细胞的区域发现粘液阳性的瘤细胞，表明肿瘤不起源于这个区域该方法还用于真 菌和隐球菌染色原理：铝与胭脂红形成一种螯合物，这种分子变为正电荷允许它与低密度的酸基质像粘液这类物质结合对照：小肠固定：10%缓冲福尔马林切片：石蜡切片4-5m用品：用蒸馏水漂洗玻璃器皿，搅拌电炉，磁力搅拌棒，立式染色缸，微波炉，500ml烧杯试剂：Southgate液：胭脂红1g，氢氧化铝1g，50%乙醇100ml充分混合后加无水氯花铝0.5g，小火煮沸2分钟30秒放凉后，过滤，冰箱保存稳定性6个月注意：易燃，避免接触与吸收Mayer苏木精：见刚果红步骤马休黄(metanil yellow)液：马休黄0.25g，蒸馏水100ml，冰醋酸0.25ml混合后，标记日期，稳定 性1年注意：避免接触与吸收。
安全措施：在通风柜内配制染液和微波液，带手套，穿工作衣氯化铝需要慢慢加温，避免粉尘马休黄：雄性鼠长期喂养研究表明，作用的靶器官生殖系统，避免接触与吸收粘液胭脂红染色法步骤1. 脱蜡至蒸馏水2. Mayer 或 Weigert 苏木精 10ml3. 自来水洗5min4. 探粘液胭脂红染液，微波炉高档，45秒5. 蒸馏水快速漂洗6. 马休黄液1min7. 无水乙醇快速脱水3次，透明，封固结果：粘液深玫瑰色，核黑色，其他成分 黄色探常规方法：胭脂红染液室温染1h第四节色素染色含铁血黄素含铁血黄素染色的应用：1. 证明组织内局部的各种出血性病变如 外伤引起的出血，陈旧性出血灶，梗死的出血带，各种肿瘤所 致的出血2. 慢性心衰所致的肺淤血,可见大量含铁血黄素沉着3. 用于区分其它色素Perls反应法(普鲁士蓝反应)试剂：1. Perls液：20%亚铁氰化钾水溶液25 ml, 2%盐酸水溶液25 ml两液分别配制贮存，临用前等量混合， 过滤后使用2. 0.5%碱性复红酒精溶液 碱性复红0.5g，50%酒精100 mlPerls反应法（普鲁士蓝反应）步骤1. 石蜡切片脱蜡至水2. Perls 液 20-30 min。
3. 蒸馏水充分洗4. 0.5%碱性复红液30-50秒5. 直接着用95%酒精迅速分化6. 无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固结果：含铁血黄素呈蓝色,其它呈红色探①甲醛固定时间不宜太长②Perls液临用前新鲜配制③盐酸必须化学纯④在染色过程中避免 自来水冲洗,防止铁污染黑色素黑色素染色的应用：1. 用于黑色素瘤的诊断2. 能为色素痣、透明细胞肉瘤、髓母细胞瘤提供诊断依据3. 用于区分含铁血黄素、脂褐素及其它色素Masson-Fon tana's 银染色法试剂：氨银液：5%硝酸银水溶液40 ml,然后逐滴加入浓氨水，至产生沉淀，再继续滴加氨水至沉淀消失，再加5%硝 酸银水溶液数滴使溶液呈微乳白色装在棕色瓶内，冷暗处保存一个月Masson-Fon tana's银染色法步骤1. 石蜡切片脱蜡至水2. 蒸馏水洗3-5 mim3. 氨银液置室温下避光浸染12-18 h4. 蒸馏水洗1-2 min5. 0.2%氯化金水溶液处理5-10 min6. 蒸馏水洗1-2 min7. 5%硫代硫酸钠水溶液固定5 min8. 充分水洗5 min9. H.E或中性红液复染10. 95%酒精及无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：黑色素及嗜银细胞颗粒呈黑色，其它组织呈复染的颜色第五节病理内源性沉着物病理内源性沉着物是色素沉着物的一部分比较重要的有纤维素、玻璃样物质、淀粉样物质和尿酸盐等一） 纤维素的特点和组成纤维素又称纤维蛋白，它是血液内的纤维蛋白原分子聚合形成的特殊蛋白质在某些疾病的发病过程中， 在病变处血管内、外有纤维素形成并沉着在组织中引起这种病理改变最常见的是急性炎症反应，由于炎 症刺激使血管 壁通透性增加，纤维蛋白渗出，形成纤维素性炎另外一种是由于慢性过敏反应抗原抗体与 血管内渗出的纤维蛋白共同形成沉淀物，使结缔组织呈纤维样坏死改变通常称为纤维蛋白样变或纤维样 坏死多见于全身结缔组织疾病二） 纤维素染色的应用1•炎症渗出性病变：大叶性肺炎，白喉，细菌性痢疾及结核性胸、腹膜炎等2•风湿性肉芽组织、恶性高血压以及一些胶原性疾病等3•弥散性血管内凝血（DIC）4•全身性结缔组织疾病5•用于肾小球包氏囊内纤维素沉着的观察MSB 法：（Martius-scarlet-blue 马休猩红蓝法）固定：甲醛升汞固定一周以上如果用其它固定液固定的组织，可用甲醛升汞第二次固定或在染色前用 3%氯化汞的饱和乙醇苦味酸液中处理30-60 min。
有助于染色甲醛升汞固定液：氯化汞（饱和水溶液）90 ml， 40%甲醛 10ml试剂：1•马休黄液：马休黄0.5 g，磷钨酸2.0 g，95%酒精100 ml2•亮结晶猩红6R液：亮结晶猩红6R 1.0g，蒸馏水97.5 ml，冰醋酸2.5 ml3•溶性蓝液：溶性蓝0.5g，蒸馏水99 ml，醋酸1 ml4•青天石蓝液：铁明矶2.5g，溶于50ml蒸馏水内置室温过夜，加入0.25g，天青石蓝，煮沸3 min过滤 后再加入7 ml甘油可保存数月5. Mayer明矶苏木精液MSB染色法（Martius-scarlet-blue马休猩红蓝）染色法步骤1. 切片脱蜡至水2. 常规去汞处理后入蒸馏水洗3. 天青石蓝液染核3-5 min4. 自来水洗5. Mayer苏木精染核5 min6. 自来水洗7. 盐酸酒精稍分化8. 自来水充分水洗9. 95%酒精洗10. 马休黄液2 min11•蒸馏水洗12.亮结晶猩红6R液10 min13.蒸馏水洗14.1%磷钨酸液处理3-5 min （起分化猩红色的作用）15.蒸馏水洗16.溶性蓝液5-10 min17.1%醋酸液洗18.用滤纸吸干19.无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：肌肉、纤维素呈红色；陈旧性纤维素呈蓝色至紫黑色；核呈黑色；红细胞呈黄色；结缔组织包括基 底膜呈蓝色探①此法能清楚的显示新鲜纤维素和陈旧纤维素②分化时要适当③染料不全时可以替代，如桔黄G 苦味酸乙醇饱和液代替马休黄，用酸性复红代替亮结晶猩红6R液，以苯胺蓝代替溶性蓝使用，其结果和原 法基本相同Von Kossa's染色法-钙用途：H.E染色在人体内任何区域可以发现不正常的钙沉积物钙呈深蓝-紫色原理：组织切片用硝酸银液处理钙被银沉积物替换，由强光还原为可见的金属银对照：已知含有钙盐沉积物的组织或未脱钙的骨组织固定：10%福尔马林切片：石蜡切片4微米用品：经酸清洁的玻璃器皿、60W灯泡、箔纸或镜子试剂：5%硝酸银液： 硝酸银25g蒸馏水500ml混合之后，装入酸清洁过的棕色瓶中贮存于冰箱内，液体稳定1年注意：避免接触与吸入5%流代硫酸钠水溶液（Hypo） 注意：避免接触与吸入核固红：见网状纤维染色安全：戴手套、眼镜、穿工作服避免接触与吸入严重刺激皮肤和眼睛，摄入会产生剧烈胃痛可致瘤, 氧化剂流代硫酸钠粉是眼、皮肤和呼吸道刺激物摄入会产生胃痛Von Kossa's染色法-钙步骤1. 切片脱蜡至蒸馏水。
2. 切片入5%硝酸银液，放在阳光下或60W灯泡前把箔纸或镜子放在染色缸的后面用于反射光线放 置1个小时或直到钙变黑为止3. 蒸馏水洗3次4. 5%流代硫酸钠5min5. 水洗之后再用蒸馏水冲洗6. 核固红染5min7. 水洗8. 无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固结果：钙盐黑色，核红色，细胞浆粉红色茜草红S-钙染色法用途：证实组织中的钙原理：在螯合过程中钙形成一种茜草红S-钙复合物该反应是双折射的控制：知道切片组织含有钙固定：105福尔马林或乙醇福尔马林切片：石蜡切片4mm用品：所有玻璃器皿用双蒸馏水洗立式染色缸，pH仪，滤纸，显微镜，偏振透镜试剂：茜草红S液：茜草红S 20g蒸馏水 100.0ml将液体混合后用0.5%氢氧化铵调pH至4.1〜4.3pH是关键，液体应新鲜配制注意：避免接触与吸收丙酮-二甲苯:丙酮25.0ml二甲苯 25.0ml新鲜配制注意：易燃安全措施：戴手套，防护眼镜，穿工作服氢氧化铵：刺激皮肤和眼睛，有腐蚀性，能引起烧伤丙酮：吸收有一定的毒性可引起头昏，头痛，而且吸入刺激呼吸系统，皮肤接触可引起脱脂和皮炎，易 燃茜草红S-钙染色法步骤1. 脱蜡至70%乙醇2. 蒸馏水迅速漂洗。
3. 茜草红S液5min，显微镜检查出现橘黄色4. 去掉多余的染液，吸干切片5. 丙酮20个浸蘸6. 丙酮-二甲苯20个浸蘸7. 二甲苯透明，封固结果：钙盐沉积橘红色第六节病原微生物阿尔辛黄甲苯胺蓝幽门螺杆菌染色法试剂：A液：1%过碘酸水溶液（过碘酸1g，蒸馏水100 ml）B液：焦亚硫酸钠5g，蒸馏水100 ml，1N盐酸1 mlC液：阿尔辛黄1g，50%乙醇100 ml，冰醋酸3 ml，用前过滤D液：1%甲苯胺蓝水溶液2 ml，蒸馏水50 ml，3%氢氧化钠2滴阿尔辛黄甲苯胺蓝幽门螺杆菌染色法步骤1. 切片脱蜡至蒸馏水2. 用A液氧化10 min3. 充分水洗4. 用B液处理5 min5. 水洗 2 min6. 用C液染5 min7. 充分水洗8. 用新鲜配制的D液染3 min9. 充分蒸馏水洗10. 吹干或干燥箱烤干11. 二甲苯透明，中性树胶封固结果：胃幽门螺杆菌蓝色，粘蛋白黄色，背景淡蓝色Sayeed's幽门螺杆菌染色法0.5%过碘酸水溶液：过碘酸0.5g，溶于100ml蒸馏水中Schiff's试剂配制：(1) 将200ml蒸馏水煮沸，停火后加入碱性品红lg，搅拌至染料完全溶解。
2) 待溶液冷至50°C加偏重亚硫酸钠1g摇荡溶解后冷至室温(25°C)3) 再加N-HCI液(N-HCI液：8.15ml浓盐酸加蒸馏水至100ml) 20ml充分摇荡4) 在室温暗处避光保存18-24h，溶液呈草黄色5) 加新鲜活性炭2g充分摇荡数分钟6) 用滤纸过滤，过滤液应无色或淡黄色然后盛入棕色小口瓶中置冰箱(4°C )贮存，贮存液可保存一个 月，如变为淡红色即为失效Mayer苏木精液：苏木精 1g硫酸铝钾 50g碘酸钠 0.2g蒸馏水 1000ml水合氯醛 50g枸橼酸 1g将苏木精，硫酸铝钾及碘酸钠依次加入蒸馏水中，略加热搅拌，待全溶解后过夜再加入水合氯醛及枸橼 酸并加热至煮沸5min，冷后过滤备用染色时间5-10min美蓝贮存液：美蓝(亚甲蓝) 1.4g95%乙醇 100ml10ml美蓝工作液： 美蓝贮存液Sayeed's幽门螺杆菌染色法染色方法步骤1.切片脱蜡至纯乙醇2.蒸馏水漂洗3.0.5%过碘酸水溶液1min4.自来水充分水洗5.蒸馏水洗6.Schiff's 试齐 Ll 1min7.自来水洗2min8.蒸馏水洗9.Mayer's苏木精染液染2min10.自来水充分水洗。
11.美蓝工作液1min12.蒸馏水洗13.脱水，透明，中性树胶封固结果：粘蛋白粉红色；幽门螺杆菌 蓝色槐黄-若丹明荧光素抗酸杆菌染色法用途:证实抗酸菌，结核杆菌原理:两种染料都是短波长荧光碱性染料控制：组织包含抗酸微生物在染色准备和步骤中应用微孔过滤水漂洗固定液：10%福尔马林切片：石蜡切片4-5微米 用品：立式染色缸（所有玻璃器皿应该用双蒸水洗）微波炉，荧光显微镜试剂：槐黄-若丹明液：槐黄010・5g若丹明B5. 25g甘油525.0ml石炭酸70・0ml微孔过滤水350.0ml用蒸馏水漂洗玻璃器皿，把液体放入60°C烤箱中过夜，在搅拌器上混合，用前过滤，用后丢弃，标明日期，， 液体稳定性1年注意：可能致癌0.5%酸乙醇：盐酸 5.0ml70%乙醇 99.5ml充分混合，标明日期，液体稳定性1年0.5%高锰酸钾：高锰酸钾 0.5g蒸馏水 100ml新鲜配制，用后丢弃注意：有腐蚀性安全措施：戴手套，穿工作服，戴防护眼镜，在通风好的地方操作，在通风柜中操作更好避免化学物质 的接触与吸收槐黄0：可能对人类致癌，动物研究证实可引起动物长肿瘤若丹明B：可能致癌，可疑致瘤石炭酸：经吸收，吸入和皮肤吸收中毒。
迅速通过皮肤吸收引起心率加快，痉挛而死亡会烧伤眼睛和皮 肤，有止疼作用可使疼痛消失影响目标器官消化，神经，泌尿系统盐酸：略高锰酸钾：刺激皮肤，眼睛，吸收会导致严重的肠胃损坏槐黄-若丹明荧光素抗酸杆菌染色法步骤1. 切片脱蜡至水2. 槐黄-若丹明液微波炉80功率，45秒，维持5min3. 用酸乙醇分化切片到无色4. 流水冲洗5. 高锰酸钾2min6. 用蒸馏水漂洗7. 脱水，透明，盖上盖玻片方便的方法：烤箱60C1小时结果：抗酸微生物淡红-黄色荧光；背景黑色抗酸杆菌Ziehl-Neelsen染色法（AFB）用途：用于证实抗酸杆菌引起结核病的分支杆菌属原理：结核菌的抗酸染色性与菌体表面索状结构内所含肽糖脂的分枝酸残基（Arylmethane mycolate）和 胞壁固有层的完整性有关碱性复红同分枝残基酸牢固结合形成复红-分枝酸复合物，用盐酸酒精漂洗褪色 时，能够抵抗稀酸的漂洗，难以将染料从复合物中再溶解而渗入菌体细菌的荚膜分子量很高以至于在室 温呈蜡状，而且细菌的荚膜能够防止水系碱染液（革蓝氏）染液的渗透对照：含有抗酸菌的组织，染色过程中使用微孔过滤水漂洗固定：10%甲醛切片：石蜡切片4-5微米。
用品：所有玻璃器皿用双蒸水冲洗，立式染色缸，微波炉试剂：Ziehl-Neelsen 酚品红液：液体：碱性复红 2.5g蒸馏水 250.0ml无水乙醇 10ml石炭酸（被溶化）12.5ml充分混合后过滤于棕色瓶内，标明原始日期，液体稳定性1年注意：致癌剂，有毒1%酸酒精：盐酸 10.0ml70% 乙醇 990.0ml充分混合，标明原始日期，液体稳定性1年注意：有腐蚀性甲基蓝贮存液：甲基蓝 0.7g蒸馏水 50.0ml充分混合后，过滤于瓶中，标明配制日期，稳定性1年甲基蓝工作液：甲基蓝贮存液 5.0ml蒸馏水 45.0ml倒入立式染色缸，稳定性两个月注意：避免接触与吸收安全措施：戴手套和防护镜，穿工作衣防热打，开盖子，液体在通风柜内排尽避免接触与吸收碱性复红：致癌剂石炭酸：通过消化道和皮肤吸收中毒，通过皮肤吸收迅速，引起心率加快，痉挛而死亡会烧伤皮肤和眼 睛，止痛作用使疼痛消失作用的目标器官消化、神经和泌尿系统盐酸：对皮肤、眼睛和呼吸道有强烈的刺激作用目标器官通过皮肤呼吸道生殖和胎儿系统吸收甲基蓝：对老鼠的生殖力产生有害的作用抗酸杆菌Ziehl-Neelsen染色法（AFB）步骤1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 酚品红液微波炉80power，45秒，切片在热染液中维持5min.染液每周过滤1次3. 自来水冲洗4. 1%酸乙醇漂洗腿色至淡红色，停止脱色5. 自来水洗5min6. 蒸馏水漂洗7. 甲基蓝工作液30秒8. 自来水洗9. 脱水、透明、封固结果：抗酸酸杆菌鲜红色，背景蓝色探常规方法：60°C烤箱1hoSheehan改良姬姆萨染色法用途：区分存在于早血组织中的细胞，该染色也用于证实某些细菌原理：“中性”染料与碱性染料亚甲蓝和酸性染料伊红结合，在染色时可提供一种较宽的染色范围染色 的关键是pH，比较理想的办法是调整不同的固定剂，越酸的pH值对染色质染色的选择性就越大而且细胞 浆嗜碱性越少酸性越少的pH值细胞核越浓而且增加了细胞浆的嗜碱性pH范围应该在6.4〜6.9之间对照：脾固定：10%福尔马林，B-5固定剂切片：石蜡切片4-5m用品：玻璃器皿用双蒸水洗，立式染色缸，滤纸，染色架，吸管安全措施：戴手套，防护眼镜，穿工作服避免染料和化学物质的接触与吸收试剂：瑞士染液:商品瑞士染液姬姆萨（Giemsa）：商品Giemsa染料盐酸缓冲液pH 6.8:0.3g0.7g100.0ml50.0ml2.5ml2.5ml磷酸钠磷酸二氢钠蒸馏水冰箱保存，稳定1年。
Giemsa工作液：磷酸缓冲液Giemsa染液甲醇（无丙酮） 新鲜配制，过滤，用后丢弃0.25%醋酸水溶液：醋酸 1.0ml蒸馏水 100.0ml稳定1年Sheehan改良姬姆萨染色法步骤1. 脱蜡至无水乙醇2. 甲醇浸洗换3次3. 把切片放于染色架上，滴加瑞士染液5min4. 不倒掉染液加等量的蒸馏水直到金属光泽出现保留5min5. 直接将切片放入Giemsa染液中，室温45min6. 按如下步骤分化脱水① 醋酸水溶液② 蒸馏水③ 95%乙醇④ 100%乙醇⑤ 100%乙醇⑥ 二甲苯3 浸蘸（dips）2dips3dips3dips3dips3dips7.中性树胶封固结果：核蓝色，立克次氏体紫红色，胞浆灰蓝，红细胞淡黄或粉红色Grocott's六次甲基四胺银改良染色法(GMS)用途：证实真菌原理：真菌细胞壁的粘多糖成分氧化释放醛基，醛基然后与硝酸银反应，经过还原成为可观察到的金属硝 酸银对照：含有真菌的组织或含有曲菌病和真菌性肺炎的组织固定：10%福尔马林切片：石蜡切片4-5m用品：酸洗过的玻璃器皿，立式染色缸，微波炉试剂：2%络酸三氧化络 10.0g蒸馏水 500.0ml混合后使用，液体稳定6个月。
注意：腐蚀酸，可能致癌剂，避免接触与吸收1%焦亚硫酸钠：焦亚硫酸钠 5.0g蒸馏水 100.0ml液体稳定3个月六次甲基四胺(Methenamine)银：贮备液：3%六次甲基四胺 100.0ml5%硝酸银 5.0ml混合后倒入酸洗过的棕色瓶内，冰箱内保存，液体稳定3个月注意：有腐蚀，可能致癌工作液：六次甲基四胺银贮存液 25.0ml蒸馏水 25.0ml使用前混合，用后丢弃0.5%氯化金:氯化金0.5g蒸馏水100.0ml混合后存放于干净的瓶中，冰箱内存放稳定1年注意：避免接触与吸收0.2%亮绿:亮绿SF黄0.2g蒸馏水0.2ml100.0ml冰醋酸 混合后稳定6个月注意：避免接触与吸收安全措施：戴手套，防护眼镜，穿工作服，应在通风好的地方操作，最好在通风橱内操作，避免染料和化 学物质的接触与吸收络酸：腐蚀皮肤和粘膜，毒性强，影响器官肾脏，致癌剂焦亚硫酸钠：通过吸收中毒，能引起胃肠损坏，对皮肤眼睛和粘膜有刺激性硝酸银：对皮肤和眼睛有严重的刺激性，氧化剂，吸收会产生强烈的胃肠不适可能致癌剂，不肯定的致 瘤剂硫代硫酸钠：略亮绿SF黄：可能致癌剂Grocott's六次甲基四胺银改良染色法步骤1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 2%络酸微波炉高功率45秒，保留5min3. 自来水洗，蒸馏水漂洗4. 1%焦亚硫酸钠室温1min5. 自来水冲洗，蒸馏水漂洗3次6. 六次甲基四胺(Methenamine)银工作液，微波炉高功率70秒，组织应该棕黄色，切片在热液体中搅 动几次7. 蒸馏水漂洗2次8. 0.5%氯化金1min或直到变为灰色9. 蒸馏水洗10.11.12.13.14.5%硫代硫酸钠3min自来水冲洗，蒸馏水漂洗亮绿工作液1min蒸馏水漂洗脱水、透明、封固结果：真菌黑色，背景绿色探传统方法：5%络酸，60°C水浴1小时银液60°C水浴1小时或变为棕色除此之外应注意：①如果络 酸变为棕色需要更换一般宁要2%的不要5%，络酸的浓度越高切片经过微波炉时组织越容易脱落②如 果细菌不变黑，检查：a新鲜氯化金b新鲜焦亚硫酸钠c新鲜硼酸钠③如果银工作液变为混浊或立式染 色缸切片上呈镜面改变，应该配新液微波Giemsa染色法试剂：盐酸乙醇液：38%盐酸0.5ml, 70%乙醇99.5mlGiemsa贮备液：把60ml甘油放入250ml烧瓶中再加Giemsa染料0.75g，然后放入56〜 58C烤箱内过夜将染液移出烤箱后趁热加入甲醇40ml，充分混合后棕色瓶内保存。
10%Triton X-100： Triton X-100 10ml,蒸馏水 90ml,液体要充分混合Giemsa 工作液：Giemsa 贮备液 10ml，甲醇 1ml，蒸馏水 40ml, 10%Triton X-100 4ml1%冰醋酸水溶液：冰醋酸1ml,蒸馏水99ml微波Giemsa染色法步骤1. 切片脱蜡至蒸馏水2. 切片盐酸乙醇中液浸10min3. 水洗 5min4. 蒸馏水洗5. 切片在Giemsa 工作液内经微波炉60W （输出量600W） 4min6. 蒸馏水洗7. 1%冰醋酸水溶液分化数秒钟8. 95%乙醇，无水乙醇脱水9. 二甲苯透明，中性树胶封固结果：细菌（幽门螺杆菌）呈蓝色或淡紫色，细胞核呈蓝色，淋巴细胞胞浆呈淡蓝色或紫色肥大细胞胞 浆，嗜酸性粒细胞胞浆颗粒呈红色红细胞呈橘黄色黑色素颗粒蓝黑色或深绿色乙型肝炎表面抗原染色地衣红（ORCEIN）染色- INCLUSION BODIES-HEPATITS B ANTIGEN用途：病毒本身非常小，只有用电子显微镜才能观察到，病毒可被看作为寄生虫，因为它们只有在宿主细 胞内才能繁殖维多利亚蓝法试剂：维多利亚蓝染液：维多利亚蓝2g,糊精0.5g，间苯二酚4g，蒸馏水200ml。
取500ml烧杯，加入蒸馏水, 把维多利亚蓝、糊精和间苯二酚加入溶解，在慢火中煮沸，然后再加入已煮沸的30%三氯化铁液25ml，继 续煮沸3分钟冷却后过滤，将沉渣和滤纸放在60°C烤箱内烤干，该沉渣为蓝绿色取另一只烧杯盛70% 乙醇400ml溶解沉渣，然后加入冰醋酸4ml和苯酚6g作为防腐剂，放置一周成熟后使用酸性高锰酸钾液：A液：高锰酸钾0.5g，蒸馏水100 mlB液：浓硫酸0.5ml,蒸馏水99.5ml临用前A、B两液等量混合2%草酸水溶液：草酸2g，蒸馏水100ml核固红染液：核固红0.1g，蒸馏水100ml，硫酸铝5g，麝香草酚50mg先把硫酸铝溶于蒸馏水，然后再加入核固红，稍加温溶解，冷却后过滤，最后加入麝香草酚维多利亚蓝方法步骤1. 切片脱蜡至水2. 酸性高锰酸钾水溶液氧化5min3. 稍水洗4. 2%草酸水溶液漂白2分钟5. 流水冲洗5min6. 70%乙醇稍洗7. 用维多利亚蓝染液染24〜48h8. 70%乙醇浸洗2次，1〜3min/次9. 流水稍冲洗10. 核固红染核5〜10min11. 稍水洗12. 常规脱水透明，中性树胶封固结果：肝细胞内的乙型肝炎表面抗原呈蓝色，弹力纤维和胶元纤维也着蓝色，胞核红色。
Golgi-Cox法显示神经元胞体形态1. 取材10mm,在如下工作液内，室温6-8周或37°C时间减半工作液容器底垫上玻璃丝或脱脂棉,纱布，加盖，放到暗处，避光在第二天换新液，以后再更换几次以下3种贮存液，可长期使用1)5%氯化汞水溶液(2)5%重铬酸钾水溶液(3)5%铬酸钾水溶液（新鲜配制）工作液临用前按以下顺序混合(1)液20ml(2)液20 ml蒸馏水 40ml待混匀后，加（3）液16ml2. 流水冲洗6-8小时后脱水，火棉胶包埋，切片50-100微米3. 切片入5%碳酸钠水溶液1小时或入5%浓氨水2-5min在氨水中时间不能过长，否则切片上会 出现黑色沉淀4. 切片充分水洗后，用95%酒精脱水，在用氯仿：二甲苯：无水酒精（1：1：1）最后用木榴油或香柏油透明，经二甲苯洗去木榴油或香柏油，中性树胶或加拿大树胶封片，不加盖玻片 晾干或37C烘干结果：神经元、神经胶质细胞等胞体及突均呈黑色，背景淡黄色甲苯胺蓝染色法用于尼氏小体试剂配制：1%甲苯胺蓝液：甲苯胺蓝1g，蒸馏水100ml，先用50ml蒸馏水溶解甲苯胺蓝，然后加蒸馏水至100ml，过 滤后使用甲苯胺蓝染色法步骤1. 石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2. 在予热60C的1%甲苯胺蓝液40min3. 蒸馏水洗4. 70%和80%酒精浸洗5. 95%乙醇分化，显微镜下控制分色，清晰显示尼氏小体为止，背景淡蓝色为宜6. 无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固结果：尼氏小体-紫蓝色，细胞核-蓝色硫堇染色法显示尼氏小体固定与切片10%中性福尔马林，80%酒精或Carnoy液固定石蜡切片8-10微米硫堇液：无水酒精10ml，新鲜安尼林油（苯胺）1ml，混合后加蒸馏水100ml，最后加硫堇（thionin）0.25g， 混合后过滤使用0.1%伊红的无水酒精液：硫堇染色法显示尼氏小体步骤1. 切片常规脱蜡至水，蒸馏洗2. 硫堇液染5min3. 无水酒精100ml加冰醋酸2-3滴分色，将切片外观所附的蓝颜色分掉也可再用0.1%伊红的无水酒 精液快速复染，但此时仍有分色作用，防止分色过度4. 二氧六环换洗两次再用二甲苯透明，封片结果：尼氏小体及核仁深蓝色背景淡红色硫堇染色法试剂：0.2%硫堇水溶液：硫堇0.2g，蒸馏水100ml，溶解后过滤使用染色步骤1. 石蜡切片脱蜡至蒸馏水2. 2%硫堇水溶液60°C温箱内染30-40min3. 蒸馏水洗4. 95%酒精分色，显微镜下控制尼氏小体清晰为止。
5. 无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固结果：尼氏小体-深蓝色，细胞核-淡蓝色改良Glees和Marsland染色法试剂：1. 20%硝酸银水溶液：2. Glees溶液：20%硝酸银30ml，无水酒精20ml，氨水将酒精加入硝酸银液中，立即出现乳白 色沉淀再逐滴加入氨水直到沉淀溶解为止最后再滴加4滴氨水，过滤后使用3. 5%硫代硫酸钠水溶液：硫代硫酸钠5g，加蒸馏水至100ml染色步骤1. 石蜡切片脱蜡至蒸馏水2. 预热37C20%硝酸银水溶液浸染30min （切片为淡黄色）3. 不洗，直接入10%福尔马林液直到液体变清为止4. 快速过Glees溶液后，再放入Glees溶液30秒-1 min5. 取出切片，用滤纸吸干组织周围多余Glees溶液6. 不洗，直接放入10%福尔马林液还原2-3min，更换2-3次10%福尔马林液7. 自来水洗，然后换蒸馏水洗8. 5%硫代硫酸钠水溶液固定切片5min9. 充分自来水洗10. 95%酒精，无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固结果：神经元轴突及神经纤维-黑色，背景-黄色探 ①第5步应镜下控制，如浸度不够深可再重复第4步一次②所用玻璃器皿，玻片应化学纯净,这样可减少非特异性着色及氨银夜污染。
Van Gieson染色法Van Gieson 法1、 试剂配制：饱和苦味酸水溶液（约1.22%） 150 ml1%酸性品红 10 ml两种溶液用前混合在一起2、 染色步骤：（1）切片脱蜡至蒸馏水2） 苏木素深染10〜15分钟）（3） Van Gieson中染半分钟4） 蒸馏水洗5） 置60°C温箱中烘干6） 二甲苯透明，封固3、 结果：胶原纤维红色，肌纤维、胞浆、红细胞黄色4、建议：用稀释的Van Gieson液进行染色，不用95%的酒精分化，结果色泽鲜艳，而且着色均匀 弹力纤维染色Schmorl染色法石炭酸（苯酚）-品红液：碱性品红2g,无水酒精50ml，熔化石炭酸25ml，在37°C温箱过夜，冷后过滤Weigert间苯二酚-品红液：碱性品红lg,间苯二酚（Resorcin）晶体2g，蒸馏水100ml在锥形烧瓶内煮沸，加29%三氯化铁水溶液12.5ml搅拌并继续煮沸2-5mine冷后过滤，烘 干滤纸及沉淀，放入烧瓶并加95%酒精100ml在水浴加温至染料全溶解，待冷却后过滤，并补足因加热蒸 发的酒精至100ml最后加浓盐酸2ml摇匀备用弹力纤维Schmorl染色法步骤1. 石蜡切片脱蜡至水。
2. 石炭酸-品红液37C染1h，或室温24h3. 70%酒精漂洗4. Weigert间苯二酚-品红液染色20-30min5. 无水酒精分色约1/2h，如染色过度也可改用0.5%盐酸的95%酒精分色6. 流水冲洗后换蒸馏水漂洗7. 常规苏木精染核5-10min8. 水洗9. Van Gieson 液复染 3-5min10. 蒸馏水洗11. 酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固结果：弹力纤维蓝黑色，胶原纤维红色，肌纤维黄色，细胞核蓝色Gomori's醛复红染色法用途：显示血管壁、肺泡壁及皮肤组织中的弹力纤维为佳组织固定：用Bouin液，AF液或1%福尔马林固定，避免用含铬盐固定液试剂：1. 盐酸性复红0.5g，70%乙醇99ml，浓盐酸1ml，三聚乙醛（副醛）1ml将复红溶于乙醇内，然后加 入盐酸和三聚乙醛，充分溶解后在室温中放置24-48小时，自然成熟当染液变为紫色即可应用成熟的液 体在4度冰箱内可保存2-3个月2. 橘黄G染液：橘黄G0.5g，磷钨酸2g，95%乙醇100ml3. Lugol's碘液：碘1g，碘化钾2g，蒸馏水100ml先将碘化钾溶于20ml蒸馏水中，再加入碘，完全溶解后将剩余的蒸馏水加入即可使用。
4. 5%硫代硫酸钠水溶液染色步骤1. 石蜡切片3-5微米，常规脱蜡至水2. Lugol's 碘液 5-10min3. 水洗 2-3min4. 5%硫代硫酸钠水溶液脱碘5min。