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液相常见问题

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液相常见问题_第1页
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1.如何排除流动相中的气泡?如何排出流动池中的气泡?避免流动相中产生气泡的最佳方式是将流动相经脱气装置进行脱气如果没有脱气装置,则可以在流动相溶剂瓶中通入氦气进行脱气也可以在检测器的出口端加一根细管线以调节流动池中的背压,但必须注意不要超过流动池的最大压力,否则会造成流动池漏液或流动池损坏如果流动池中出现气泡,则先摘下色谱柱,用一根管线直接将流动相接入检测器的入口将异丙醇以较大的流速注入流动池直到基线上看不到毛刺为止气泡就应该清除掉了2 如何减少基线噪音?无规律噪音可能与污染有关请冲洗色谱柱,对样品做合适的前处理以避免污染,并使用HPLC级别的溶剂连续噪音有可能由检测器或泵造成要确定问题是否发生在检测器还是在泵,请先关泵停掉流量,监测基线如果此时基线平稳,则噪音可能与泵有关系使用ChemStation诊断或LC手持控制器检查泵方面的故障如果停泵后噪音继续存在,则说明噪音与检测器有关首先,请尝试更换灯如果问题依然存在,则请与安捷伦科技公司联系在中国,请拨打80082032783 什么原因导致基线毛刺?这很有可能是流动池内有气泡请先停泵来进行确认,如果毛剌消失,则很有可能是由于流动池内有气泡。

需要冲洗流动池如果毛剌仍然存在,则需检查检测器本身的电噪音有关如果需要更多帮助,则请致电安捷伦科技公司在中国,请拨打80082032784 色谱图上出现鬼峰如何消除?可能的原因:1. 上次进样遗留组分产生2.有污染3.有气泡4.色谱柱问题5.保护柱失效建议用户:1. 做样品后应保证有足够时间冲洗色谱柱,有必要的话在运行结束后使用更强溶剂冲洗色谱柱2. 洗脱原色谱柱中的原有污染3. 为确保系统中没有气泡,只使用彻底脱气后的溶剂4. 更换色谱柱5. 更换保护柱6. 检查流动相纯度7. 检查样品中的其他成分5 如何决定何时更换保护柱?许多色谱人员在测试一定数量的样品和标准样后更换保护柱样品数量通常由实验决定,在长时间未更换保护柱而造成分析柱破损时或样品分析数量增加,而保护柱需要更换保护柱的更换频率通常根据经验而定,按照每个方法/样品类型综合考虑,但是许多分析人员会在完成一定数量的样品分析或测试一些柱的性能指标(例如增加10%峰展宽或拖尾因子,或降低10%的柱效(塔板数))后更换保护柱6 什么原因导致液相色谱仪压力过高?可能的原因:1.吹扫阀的PTFE虑芯堵塞2. 压力上限设置太低3. 压力传感器堵塞。

建议的措施:1. 打开排气阀如果压力依然很高,则更换排气阀的PTFE虑芯2. 查看软件的压力上限设置并确保设置值适于分析3. 检查系统内的堵塞部位如下所述)要检查是否堵塞,请采用隔离系统的方法来排除故障:将安装的色谱柱、预色谱柱和预色谱柱过滤器摘开1. 如果压力恢复到正常值,则在色谱柱的位置安装ZDV接头1. 如果压力正常,则色谱柱、预色谱柱或过滤器是产生问题的原因请进行更换2. 如果压力仍然很高,则在色谱柱的另一端查找堵塞位置(例如:通入检测器或从其通出的管路)2. 如果取出色谱柱后压力依然很高,则检查从排气阀到自动进样器的管路如果压力正常,则使用进样步骤命令将自动进样器的进样阀切换到路模式1.如果压力正常,则说明自动进样器堵塞请检查针、针座、针座毛细管和转子密封垫2.如果压力依然很高,则检查从进样六通阀到色谱柱入之间口的管线7何时应更换泵密封圈?泵密封圈应定期更换建议每个液相色谱仪用户建立一个泵密封圈更换的定期检修计划这应根据泵的使用和流动相组成情况而定由于它们易磨损的特点,盐缓冲大大加速密封圈和活塞的磨损在活塞下面的泵头上检测到泄漏时,保留时间不稳定时,或系统压力不稳定时,都应更换密封圈。

请按照以下程序更换所维护的泵的密封圈8当LC检测器灯强度测试没有通过时我该如何办?强度测试是内置的UV/Vis检测器诊断测试功能.是用于测试光学单元在全波长范围内的性能安捷伦化学工作站在多个波长范围测量检测器的光谱强度,针对每个范围的极限值报告Pass(通过)/Fail(失败)状态这一测试的失败是由于1. 灯老化了2. 流通池中有吸光的溶剂/空气泡3. 流通池脏了/污染了4. 光学窗口/透镜等被污染了要纠正这些问题,需要在流通池充满水/并用足够的时间让检测器稳定检查开灯的运行时间,并当其寿命到期时更换之用甲醇/无棉布清洗光学窗口9标准HPLC柱和RRLC柱有何区别?一般来说,RRLC(快速分离液相色谱)柱有较小的填料粒度-1.8微米,而传统的柱为2到10微米由于填料粒度小,故比普通柱的操作压力(400Bar)高(600Bar)10 我什么时候应当更换自动进样器阀的转子密封件?最经常的进样阀维护之一就是更换转子密封件需要更换的标志包括:1. 转子密封件堵塞2. 转子密封件中接头点之间泄漏通过观察注射针从样品瓶抽取样品后抬起时,针头有流动相液滴渗出,就可判断接头点之间有泄漏注意:接头点之间泄漏也可通过压力测试来判断。

当您发现进样体积精度变差时,您可能首先要考虑接头点之间有泄漏11 在我的二极管阵列检测器上,为什么在我更换了新的灯和流通池以后仍然有基线噪声和漂移?该问题应该与流速有关拆下流通池检查基线如果问题消除了,说明流通池被污染了(更换/清洗检测窗口),或者泵/进样器有问题或者该问题在光学系统或光学系统的部件或者更换整个光源透镜组件(部件号G1315-65201)(或者组件的单个部件,如光谱窗口,部件号79880-28111以及单色器透镜,部件号1000-0486),或者更换检测池支持窗口G1315-65202如果问题仍然存在,请联系您最近的安捷伦技术代表12 什么时候需要更换溶剂输送模块(泵)的冲洗阀中的过滤芯?确定冲洗阀滤芯是否需要更换的常见方法是打开冲洗阀,设定甲醇流速为1ml/min如果压力大于7BAR,就应该更换滤芯13在进样过程中HPLC的自动进样器为什么有压力的突变?自动进样器进样阀中的转子密封垫可能部分堵塞了请清洗转子密封垫或者更换之14怎样知道UV检测器的流动池被污染了?用工作站诊断功能作池体测试,是比较流动池二极管的样品边与参考边所测到的氘灯强度强度比值的结果(样品:参考)是测试流动池吸收的光的量。

测试可用来检验流动池窗口是脏了或者被污染了用水通过流动池作测试工作站自动计算强度比值强度比取决于流动池窗口污染的程度以及所用的流动池的类型理想的比值是1,比值为7或更大也可以接受比值较低,说明流动池窗口有一些涂层或者流动池里有气泡更多的光被流动池吸收用水冲洗流动池以去除污染物这样可以来代替溶剂,用水来冲洗这时样品溶解在水15什么是1100/1200自动进样器马达温度错误?传动部分的马达运行时所需电流过大,引起过热处理器将马达关掉,以免损坏它可能的原因:1.机械故障2.传动部分摩擦力过大3. 马达皮带张力过高4.马达损坏5. 传动部分弯板损坏建议:1. 关掉自动进样器电源开关等至少10分钟之后再开开关2. 确认传动部分的运动不受阻碍3. 更换传动部分16 为什么我的灯点不着?最大的可能是它已经超过使用期限了或者坏了根据检测器类型作诊断测试如果需要,更换灯如果问题依然存在,请联系Agilent公司17 用什么溶剂冲洗LC管线,以去除污染?已发现各含50%的IPA和水的混合溶液,能有效地除去HPLC系统的溶液管线里,毛细管里,以及流动池里的污染物水能清除盐类和其他的污染物,IPA能清除极性和非极性的污染物。

准备一瓶各含50%的IPA和水的混合溶剂,并对溶剂脱气将所有的溶剂管线连到这个瓶子里(例如连四元泵的A,B,C和D溶剂管线,连二元泵的A和B溶剂管线,连单元泵的溶剂管线)可以关掉所有检测器的灯,如果不希望IPA和水的混合液通过柱子时,可以在柱子的位置安装一个两通接头替换它18 易弯折的不锈钢毛细管线外表面上的颜色标记是什么意思?Agilent易弯折的不锈钢毛细管线外表面上的颜色标记,指示管子的内径(ID)红色指示内径为0.12mm或者0.005英寸绿色指示内径为0.17mm.或者0.007英寸蓝色指示内径为0.25mm或者0.010英寸桔色指示内径为0.50mm或者0.020英寸19 蒸发光散射检测法的好处是什么?实质上可以检测到所有的化合物检测基于所有分析物的通用属性,不需要存在发色基团和电活化基团等检测器的响应直接与洗提过的化合物质量相关可以获得无法识别化合物的精确定量分析数据20 什么是蒸发光散射检测器或ELSD?对于挥发性低于流动相的化合物,蒸发光散射检测器(ELSD)能够有效地执行敏感检测它提供了一种在等度和梯度条件下实质上通用的测量法,独立于化合物的吸收、荧光性或电活性低温蒸发技术能够检测半挥发性性和低水平感热性化合物。

21H3PO4清洗HPLC色谱柱有什么目的?经证明,磷酸洗涤剂能有效减少由于样品与HPLC系统中的金属络合而导致的拖尾一般建议用1%磷酸来清洗系统和色谱柱,以此消除这种脱尾现象,这很有效在安捷伦ZORBAXStableBond反相HPLC产品上使用这些推荐的清洗条件会取得非常理想的效果StableBondHPLC色谱柱在低PH条件下性能非常稳定-SB-C18色谱柱在0.8PH值和90癈条件下可保持稳定如何肯定峰拖尾是由于金属络合而引起的?只要辨别N或0原子上的孤对电子能否与金属螯合并形成5或者6元环金属络合物是一个普遍被忽视的峰拖尾成因,每个HPLC系统中都存在金属22如何处理HPLC中的盐带来的问题?现在有很多问题是由于用户的流动相含有盐成分造成的建议用户在清洗时将水加热后再冲洗,这样既可以将盐溶解的更好,也可以溶解一些脂溶性物质,会减少很多问题的发生,包括管路堵塞,盐析出,基线噪音…23 HPLC出“鬼峰”,如何排除HPLC出“鬼峰”大部分发生在反相体系(甲醇,乙腈,水),是溶剂被污染造成的还有一种原因是进样系统有残留正相色谱:固定相极性大于流动相极性反相色谱:固定相极性小于流动相极性€让用户运行一个空白梯度洗脱的方法,从100%水过渡到100%有机溶剂,如果“鬼峰”出现,可以判断是水被污染了(水中有藻类Algae的污染)。

如果用户是使用纯水机制作的水,这种现象是最常见的建议用户更换“娃哈哈”纯净水€进样系统有残留很容易判断,建议用户加强或改善洗针程序,延长冲洗Loop的时间24 峰面积或峰高重现性不好,偏差大?如果HPLC系统配有自动进样器,这种情况主要是自动进样器的问题€首先确认柱前压是稳定的,保留时间的重现性好(参见第1,2条)€将自动进样器的抽样速度降低到50ul/min以下(默认值是200ul/min)•您的样品有可能粘度较大,降低抽样速度可以极大地改善粘度较大的样品的进样精度€如果进样针或针座有轻微的堵塞,对进样精度的影响也非常大请参考第5条的处理办法€如果是手动进样器,请确认一定要使用Agilent配的标准进样针,且进样器的废液出口要与进样口水平,避免虹吸的影响如果是满Loop进样,建议注射5倍Loop的进样体积25 柱前压不稳定,压力上下波动?引起这种故障最常见的原因是泵里有气泡,建议用以下的方法排除€如果您的系统没有配置脱气机(二元泵),溶剂一定要经常超声脱气€脱气机的效率不够,特别是用甲醇/水的系统最容易发生可以将A,B通道串联;C,D通道串联用来延长脱气的时间,效果非常明显主动阀阀芯污染。

可以将阀芯取下,用甲醇超声清洗26 排气阀里的过滤经常芯堵塞?如果是排气阀里的过滤芯堵塞引起的压力升高,请仔细检查一下换下来的过滤芯正常情况下,一个过滤芯可以使用6个月左右,如果经常更换就有问题€如果过滤芯的颜色发黑,说明是被柱塞密封垫磨损下来的碎屑堵塞的,请确认流动相使用的缓冲盐的浓度是否太高了,是否使用了柱塞清洗装置缓冲液在泵头内部析出的盐的结晶会加速密封垫的磨损€如果过滤芯的颜色是乳白色的,非常干净说明过滤芯很有可能是被流动相污染了请检查一下您是否使用了过期的溶剂(水,有机溶剂),或质量不好的溶剂请马上更换别的品牌的溶剂或使用纯净水(推荐:娃哈哈纯净水)如果流动相经过了滤膜过滤,请确认是否使用了正确的,优质的滤膜建议您先不要使用滤膜过滤流动相,看看是否可以解决过滤芯堵塞的问题€如果存放缓冲液或水的溶剂瓶不经常清洗,该通路会生长藻类,藻类会污染整个流路系统和脱气机的腔体,藻类及其代谢产物也会堵塞过滤芯如果发生了这种情况,建议用60度的热水清洗溶剂瓶,并用异丙醇清洗整个管路和脱气机建议以后一定要用棕色瓶存放缓冲溶液,避光,并且定期清洗溶剂瓶€用户换了白头压力升高很快,还可以加一点,让用户检查一下白头是否太长,因为太长的白头如果不切平加进去压力也会升高很快27 保留时间重现性不好?保留时间不重现还会影响到峰面积的重现性,导致实验无法进行。

引起这种现象因素很多,建议检查以下几个方面:€确认流动相是新鲜配置的,比例没有错误€确认色谱柱是好的€检查一下溶剂瓶里的溶剂过滤器没有长菌,没有被堵塞€如果您使用梯度洗脱方法,请确认平衡时间足够长€仔细观察柱前压得变化,如果压力稳定,就可以判断泵的系统没有问题,请更换新的色谱柱试试€如果是压力不稳定,一定会影响保留时间解决方法请参见第2条。

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