Bradford法的突出优点是:（1） 灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg这是 因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质一染料复合物有更高的消光系数， 因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多2） 测定快速、简便，只需加一种试剂完成一个样品的测定，只需要5分钟左右 由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳 定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好因而完全不用像Lowry法那样费时和 严格地控制时间3） 干扰物质少如干扰Lowry法的K+、Na+、Mg2+离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、 甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法此法的缺点是：（1） 由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此Bradford法用于 不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用g一球蛋白为标准蛋白质， 以减少这方面的偏差2） 仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、Triton X-100、十 二烷基硫酸钠（SDS）和0.1N的NaOH如同0.1N的酸干扰Lowary法一样）。
3） 标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用Beer定律进行计算，而只能用标准曲 线来测定未知蛋白质的浓度二）试剂与器材1.试剂：（1） 标准蛋白质溶液，用g一球蛋白或牛血清清蛋白（BSA），配制成1.0mg/ml和 0.1mg/ml的标准蛋白质溶液2） 考马斯亮兰G—250染料试剂：称100mg考马斯亮兰G—250，溶于50ml 95%的 乙醇后，再加入120ml 85%的磷酸，用水稀释至1升2,器材:（1）可见光分光光度计（2） 旋涡混合器（3） 试管16支（三）操作方法1.标准方法（1） 取16支试管，1支作空白，3支留作未知样品，其余试管分为两组按表中顺序， 分别加入样品、水和试剂，即用1.0mg/ml的标准蛋白质溶液给各试管分别加入：0、0.01、 0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml，然后用无离子水补充到0.1ml最后各试管中分别加入 5.0ml考马斯亮兰G-250试剂，每加完一管，立即在旋涡混合器上混合（注意不要太剧烈， 以免产生大量气泡而难于消除）未知样品的加样量见下表中的第8、9、10管2） 加完试剂2~5分钟后，即可开始用比色皿，在分光光度计上测定各样品在 595nm处的光吸收值A595，空白对照为第1号试管，即0.1mlH2O加5.0mlG—250试剂。
注意：不可使用石英比色皿（因不易洗去染色），可用塑料或玻璃比色皿，使用后立 即用少量95%的乙醇荡洗，以洗去染色塑料比色皿决不可用乙醇或丙酮长时间浸泡考马斯亮兰法实验表格：管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 标准蛋白质 0 0.01 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10（1.0mg/ml）未知蛋白质0.02 0.04 0.06（约 1.0mg/ml）蒸馏水 0.1 0.09 0.08 0.06 0.04 0.02 0 0.08 0.06 0.04考马斯亮蓝G-250 试剂 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0每管中的蛋白质量（mg）光吸收值(A595)(3) 用标准蛋白质量(mg)为横座标，用吸光度值A595为纵座标，作图，即得到 一条标准曲线由此标准曲线，根据测出的未知样品的A595值，即可查出未知样品的蛋 白质含量0.5mg牛血清蛋白/ml溶液的A595约为0.50Bradford法的突出优点是：(1) 灵敏度高，据估计比Lowry法约高四倍，其最低蛋白质检测量可达1mg这是 因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大，蛋白质一染料复合物有更高的消光系数， 因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。
2) 测定快速、简便，只需加一种试剂完成一个样品的测定，只需要5分钟左右 由于染料与蛋白质结合的过程，大约只要2分钟即可完成，其颜色可以在1小时内保持稳 定，且在5分钟至20分钟之间，颜色的稳定性最好因而完全不用像Lowry法那样费时和 严格地控制时间3) 干扰物质少如干扰Lowry法的K+、Na+、Mg2+离子、Tris缓冲液、糖和蔗糖、 甘油、巯基乙醇、EDTA等均不干扰此测定法此法的缺点是：(1) 由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此Bradford法用于 不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用g一球蛋白为标准蛋白质， 以减少这方面的偏差2) 仍有一些物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、Triton X-100、十 二烷基硫酸钠(SDS)和0.1N的NaOH如同0.1N的酸干扰Lowary法一样)3) 标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用Beer定律进行计算，而只能用标准曲 线来测定未知蛋白质的浓度二)试剂与器材1.试剂:（1） 标准蛋白质溶液，用g一球蛋白或牛血清清蛋白（BSA），配制成1.0mg/ml和 0.1mg/ml的标准蛋白质溶液。
2） 考马斯亮兰G—250染料试剂：称100mg考马斯亮兰G—250，溶于50ml 95%的 乙醇后，再加入120ml 85%的磷酸，用水稀释至1升2,器材：（1） 可见光分光光度计（2） 旋涡混合器（3） 试管16支（三）操作方法1.标准方法（1） 取16支试管，1支作空白，3支留作未知样品，其余试管分为两组按表中顺序， 分别加入样品、水和试剂，即用1.0mg/ml的标准蛋白质溶液给各试管分别加入：0、0.01、 0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml，然后用无离子水补充到0.1ml最后各试管中分别加入 5.0ml考马斯亮兰G—250试剂，每加完一管，立即在旋涡混合器上混合（注意不要太剧烈， 以免产生大量气泡而难于消除）未知样品的加样量见下表中的第8、9、10管2） 加完试剂2~5分钟后，即可开始用比色皿，在分光光度计上测定各样品在 595nm处的光吸收值A595，空白对照为第1号试管，即0.1mlH2O加5.0mlG—250试剂注意：不可使用石英比色皿（因不易洗去染色），可用塑料或玻璃比色皿，使用后立 即用少量95%的乙醇荡洗，以洗去染色塑料比色皿决不可用乙醇或丙酮长时间浸泡。
考马斯亮兰法实验表格：管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 标准蛋白质 0 0.01 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10（1.0mg/ml）未知蛋白质0.02 0.04 0.06蒸馏水 0.1 0.09 0.08 0.06 0.04 0.02 0 0.08 0.06 0.04考马斯亮蓝G-250 试剂 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0每管中的蛋白质量(mg)光吸收值(A595)(3) 用标准蛋白质量(mg)为横座标，用吸光度值A595为纵座标，作图，即得到 一条标准曲线由此标准曲线，根据测出的未知样品的A595值，即可查出未知样品的蛋 白质含量0.5mg牛血清蛋白/ml溶液的A595约为0.50。