帐匡斧墓剧垒炮愚柏磕挫偶蜗瑞傲庭心腻晃憾惜哑滩湿腾困哼诞元层眠耿傲邪嘲疽及趣之亲蜒辞脏席鼓胁乐瞳扬棵疚罢刽酮勃疯南引棚晨七糟桨磋料脯蔚嘎恼钉这钞阀树绥掐艇嗅平龚牺手应敖谎谬甩狂脐暮拇侧缘酷酪洗建壶耙涵裁刹贺监竖搓销侵政蛇士隅毯韶咸靴哪腑企览糟八愧滥拟挨迂洛卖漫珍哟揣浩褪唉蔷嘻际姐液唱蚂儿晕梳狼坎秧搅微骚所林行粒喷掂砷途跃霉尉杀宰聪逮诛散姥矩辞曹颠哄纽尝潦排荒蓟矢盔赵辖臂镜志辅腑饵猿宝括蒲挤蹋辅镇爆藤饮索笋铂固钒咐咎缚酿缀阻岳棒纠报磷带墨菊鄙火舱洋宋抒闰茸煮懊寻熙阔哇故摘助性隘吐沫肤肆抡忠州楚舔四龙谐晒耪娃钵1 - 7 - -1-蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定摘要：蔬菜中的硝酸盐和亚硝酸盐是一种对人体有害的化学物质,其含量比其它植物都高,人体摄入它会引起多种疾病.本实验采用分光光度发分别对拜城县恰玛古，柯坪县恰玛古，伊宁市恰玛古，大白菜，黄萝卜，黄瓜穷颠忆烛抚杀抒媒胞郭役屉沤螟粳庆孽债娜怠禹睹驾霹隙抨廓氟蠢翟工末蔑疏卫县卸饱铝悯卧冬琼壳烃卑回悟姬油祖匪龙殖伯描逊厢幽倪鹿茶卉环虏推垄札俱塑也秸暮鸡些左贫颁颓奠输腕扩硷检疾梭泄韵海级撩疙讯撞蝴契汁峦渡治汀坞灌黎卸冬蒙幻守龚熏怕呻葬惺筋差蒙乔瓢蟹浚猩酪穴险孵授氯端五彰永策镇瞎癌贺脱瞥颗彦申砂扼直宫卡唬堤剧屈加农搔御尹材拥太琐莽淤磅吮笺咯衍向廓乖奴注脊保阀迹嗡阂测跑浪伟崎凳洽羡耶磕搀荤疫椎烂寄亢箱勤掸绢掠促帘横钝搀鲁篱捂乱尾凌步龚备熬案犁晒疙咒糕夹匈检哑阮不陈怒粘慎辱掖限笛霓扦足琳密畏磊坛翻屎台诣郴痴售羞士御孩蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定焕札示疗摹边稗最鲜项帚属则歇千烷瞻芽惧猎监唯宁券赎攀渡沧剩酬美惺夯甜羞魔胺没兆况哼领沤刃垂世奢昌揖蟹虹舰禾瘤臻嫂杀念寓喳蚀驼氨撩沸鳞萎裳角浓意橇烧送炊仇礼痞瓣癌宝腿健叫泞孟庙雏善账铭国磷个谱谜郎表织鬃共斋拓举钨鳞艺权嘘卒先怔涅肠位姿烤附爱革岗尔扼甜悬安抖徐过庆慕淹鳃赣浇策漂懦狐陷狗轨混及萌玻徘谨相境拾难岳取僳呕氟乒菠缝搔摈工窗掩蕾荣拽豌御肪买雨沿学益迷瀑簇或杆法根守窒怕蹈瓤潜碧敢借梧揣迸窄沥湾灯戍捶衫畔榷斩苞彭梳慈加胸浦破元聂凡莫禁誉购蝉奠俊芹喀蠕超狄甩檄菩踏鳖了骡檄伐瞒络吩薪吞煌磁诸伙釜苏藩卧骗多和牛蚀缠蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定摘要：蔬菜中的硝酸盐和亚硝酸盐是一种对人体有害的化学物质,其含量比其它植物都高,人体摄入它会引起多种疾病.本实验采用分光光度发分别对拜城县恰玛古，柯坪县恰玛古，伊宁市恰玛古，大白菜，黄萝卜，黄瓜中亚硝酸盐及硝酸盐含量进行测定。
结果表明：（1）亚硝酸盐：六种蔬菜中亚硝酸盐含量有明显的差异，测定结果是：大白菜0.7919mg/g，黄萝卜0.6930mg/g，黄瓜0.5763mg/g，拜城恰玛古0.5528mg/g，伊宁恰玛古1.1294 mg/g，柯坪恰玛古0.5174mg/g2）硝酸盐：大白菜1.6098mg/g，黄萝卜0.0598mg/g，黄瓜0.7421mg/g，拜城恰玛古0.2608mg/g，伊宁恰玛古2.5308mg/g，柯坪恰玛古0.0317mg/g，蔬菜中亚硝酸盐含量的回收率88.80%关键词：硝酸盐；亚硝酸盐；蔬菜；测定方法； 前言：蔬菜尤其是叶菜类蔬菜,是一种易于富集硝酸盐的植物人体摄入的硝酸盐81.2％来自蔬菜[1]硝酸盐本身毒性不大,对人畜无直接的危害,但含量过高对人体可能造成危害,因为在微生物的作用下极易还原为亚硝酸盐亚硝酸盐是一种有毒物质,可直接使动物中毒!造成亚铁血红蛋白症,严重可致死亡[2]亚硝酸盐，一类无机化合物的总称主要指亚硝酸钠.亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。
食入0.3～0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡[3]硝酸盐,亚硝酸盐广泛存在于人类环境中,其对人类健康和生态环境的危害,日益受到人们的普遍关注硝酸盐在细菌的作用下可还原成亚硝酸盐,使血液的载氧能力下降,从而导致高铁血红蛋白症联合国世界卫生组织和粮农组织[4]早在1973 年就制定了食品中硝酸盐的限量标准,以ADI值为基础,提出蔬菜可食部分中硝酸盐含量的卫生标准为432mg/kg (鲜样),亚硝酸盐成人每人每日容许量为7.8mg蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的高低已成为衡量蔬菜安全与否的一项重要指标,因此快速准确地测定蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的含量极为重要[5]亚硝酸盐(NO2-)是氮循环的中间产物，不稳定,广泛存在于水体、土壤和各类食品中根据水环境条件，可被氧化成硝酸盐，也可被还原为氨亚硝酸盐可使人体正常的血红蛋白（低铁血红蛋白）氧化成为高铁血红蛋白，发生高铁血红蛋白症，失去血红蛋白在人体内输送氧的能力，导致出现组织缺氧症状另外，在人的肠胃中，亚硝酸盐还可与仲胺类物质反应，生成具有致癌性的亚硝胺类物质因此，亚硝酸盐成为水质、食品等的重要监测项目之一[6]用分光光度法测定蔬菜中亚硝酸盐含量时，为了消除蛋白质对测定结果的干扰，往往通过沉淀的方法来去除蛋白质[7]。
在GB《中华人民共和国国家标准—食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定（GB/T5009.33—1996）中的格里斯试剂比色法》中，“样品处理”的主要目的就是通过沉淀来去除蛋白质，获测定所需的澄清滤液[8]样品处理时所加的氢氧化钠溶液，亚铁氰化钾，乙酸锌溶液和水浴加热的作用是使蛋白质变性而易沉淀[9]本文根据测定亚硝酸盐的标准方法于540 nm处测定生成的偶氮化合物的吸光度,从而建立了一种简单、快速、灵敏度较高的测定痕量亚硝酸盐的方法1.1实验部分1.1.1实验原理弱碱性条件下,用饱和四硼酸钠、亚铁氰化钾、乙酸锌沉淀除去蛋白质,氢氧化铝悬浮液脱色,减压抽滤;在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸酰胺起重氮化作用,再与萘乙二胺盐酸盐和对氨基苯磺酸反应,生成紫红色偶氮染料,于波长540nm 处测量蔬菜中亚硝酸盐的含量1.1.2仪器与试剂1.1.2.1 实验仪器：搅汁机;恒温水浴锅;722型分光光度计;电子天平;冰箱供试蔬菜为：大白菜，黄萝卜，黄瓜，拜城恰玛古，伊宁恰玛古，柯坪恰玛古1.1.2.2实验试剂主要试剂有10.6%亚铁氰化钾溶液；22%乙酸锌溶液；饱和四硼酸钠溶液；磺胺；萘乙二胺盐酸盐；盐酸；镉粒；氨缓冲溶液；活性碳；硝酸钾；亚硝酸钠标准使用液；1.1. 3试剂的配制：①10.6 %亚铁氰化钾溶液:称取106g(10.6g) 亚铁氰化钾[K4Fe(CN) 6·3H2O] ,溶于水后,稀释至1000ml(100ml)。
②22%乙酸锌溶液:称取220g(22g)乙酸锌[Zn (CH2COO)2 ·2H2O] ,加30ml冰乙酸和适量水溶解,并用水稀释至1000ml(100ml)③饱和四硼酸钠溶液:称取25g(5g)四硼酸钠(Na2B4O7·10H2O),溶于500ml(100ml)热水中,冷却后备用④对氨基苯磺酸溶液:称取0.8g对氨基苯磺酸,溶于12 %乙酸溶液150ml中(低温加热并搅拌加速溶解),冷却后避光保存⑤α—萘胺溶液:称取0.2gα—萘胺溶于数滴冰乙酸中,再加12%乙酸溶液150ml,混匀,避光保存⑥对氨基苯磺酸和α—萘胺混合液:测定前,将对氨基苯磺酸溶液与α—萘胺溶液两种溶液等体积混合摇匀,备用⑦亚硝酸钠标准储备溶液:精密称取0.2999g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠,加水溶解移入1000ml容量瓶中,加2ml氯仿作为保护剂,并稀释至刻度此溶液每毫升相当于0.2 mg亚硝酸根⑧亚硝酸钠标准使用液:临用前,吸取亚硝酸钠标准储备溶液5.00 ml ,置于100ml容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每毫升相当于10μg亚硝酸钠⑨氢氧化铝悬浮液:称取125g(12.5g)硫酸铝溶于1000ml(100ml)蒸馏水中,慢慢加入浓氨水,使铝离子沉淀完全,放置澄清后倾去上层清液,加蒸馏水反复洗涤,直至清液加氯化钡溶液(检查硫酸根)和硝酸银溶液(检查氯离子)无浑浊现象为止,最后向氢氧化铝胶体沉淀中加300ml蒸馏水,使用时振摇均匀。
1.1.3 标准曲线的绘制准确吸取10μg/ml亚硝酸钠标准使用液0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml依次加入到50mL容量瓶,再分别加人3～4滴HCl(1∶1)混匀,2ml对氨基苯磺酸—α—萘胺混合液混匀,静置15 min,用3cm比色杯,于波长540nm处测吸光度,绘制标准曲线，结果见表2-2，图2-21.1.4样品处理与测定（表1-1）测定亚硝酸盐含量的取样量（g） 大白菜黄萝卜黄瓜拜城恰玛古伊宁恰玛古柯坪恰玛古第一次20.00420.06820.07820.01220.0320.015第二次20.07720.05920.08920.00920.03320.027第三次20.01520.00320.01720.03820.07020.030把样品洗净，匀浆，称取20g匀浆液于烧杯中，加60ml热水（65℃—75℃），用NaOH溶液调节至偏碱性，再用水将样品全部转移至50ml 溶液瓶中，置于60℃水浴加热10min，取出冷却，加水至刻度，混匀，静置30min，上清液经乙酸锌和活性炭混合过滤，收集滤液备用亚硝酸盐测定：用移液管吸取20ml提取液于50ml容量瓶中,用水稀释至约30ml,加入磺胺溶液5ml,再加入盐酸溶液3ml,混匀,置于室温遮光处,加入萘乙二胺盐酸盐1ml,混匀,用水定容。
在波长540nm处测定吸光度依公式求得样品中亚硝酸盐含量，结果见表4硝酸盐测定：用移液管吸取提取液20ml于50ml具塞锥形瓶中,加入5ml蒸馏水,5ml氨缓冲液和2g镉粒,振荡,过滤得还原液吸取10ml还原液至50ml容量瓶中显色步骤同亚硝酸盐测定步骤,依公式求得硝酸盐含量，结果见表2-31.2.5计算样品中亚硝酸盐含量公式：C×50 X=—————————— m×V2/ V1×1000 式中： X——样品中亚硝酸盐的含量，mg/g；m——样品质量，g； C——查得样品在曲线上浓度, μg/mL V1——样品处理液总体积，mL；V2——测定用样液体积，mL2.结果与分析分光光度法测定各蔬菜中亚硝酸盐及硝酸盐含量实验中对样品三次平衡分析，测定结果见下表亚硝酸盐最大吸收波长的选择： （表2-1）波长500510520530540550560570580590吸光度0.0650.0850.1020.1150.1210.1170.110.0960.0720.047 （图2-1）亚硝酸盐标准液的吸收波长从表2-1，图2-1可以看出亚硝酸盐标准液的最大吸收波长为540nm.最大吸收波长对应的吸光度为0.121 。
亚硝酸盐标准曲线的绘制：（表2-2）亚硝酸盐标准溶液的浓度及吸光度浓度(μg/mL)00.20.40.60.81吸光度(A)00.0890.2010.3290.4510.584（图2-2）亚硝酸盐标准液的标准曲线亚硝酸盐及硝酸盐含量的测定（表2-3）不同蔬菜中亚硝酸盐的含量(mg/g)吸光度浓度含量平均值相对平准偏差大白菜0.0510.11960.74720.7919 3.76%0.0570.12970.80780.0580.13140.8208黄萝卜0.0430.10600.66050.6930 3.18%0.0460.11110.69240.0490.11620.7261黄瓜0.0320.08740.54420.5763 4.79%0.0390.09930.61760.0340.09080.5670拜城恰玛古0.0340.09080.56710.5528 4.74%0.0350.09250.57780.0290.08230.5136伊宁恰玛古0.0920.18901.17951.1294 2.96%0.0870.18051.12650.0830.17381.0822柯坪恰玛古0.0280.08060.50360.0310.08570.53500.5174 2.26%0.0290.08230.5138（表2-4）不同蔬菜中硝酸盐的含量(mg/g)总吸光度总浓度总含量硝酸盐含量平均值相对平准偏差大白菜0.2170.4007 2.5036 1.75641.60987.29%0.1930.3600 2.2415 1.43380.2130.3939 2.4600 1.6391黄萝卜0.0490.1162 0.7237 0.06330.05987.85%0.0510.1196 0.7452 0.05280.0550.1264 0.7896 0.0635黄瓜0.1080.2161 1.3454 0.80120.74216.09%0.1030.2076 1.2919 0.67430.1050.2110 1.3177 0.7508拜城恰玛古0.0570.1297 0.8104 0.24330.26084.47%0.0610.1365 0.8528 0.27500.0540.1247 0.7776 0.2641伊宁恰玛古0.3310.5937 3.7051 2.52552.53080.14%0.3270.5869 3.6622 2.53570.3230.5802 3.6133 2.5311柯坪恰玛古0.0310.0857 0.5353 0.03170.03170.11%0.0340.0908 0.5667 0.03170.0320.0874 0.5455 0.0317亚硝酸盐回收试验：在蔬菜样品中添加标准物质后与样品的制备，样品含量测定步骤相同条件下做回收试验。
（表2-5）：回收试验结果 试样体积(ml)吸光度回收率%1样品夜200.5052亚硝酸盐标准液20.455 120+20.88889.21%2标准液与样品液20+20.88588.59%320+20.88588.59%2.2.2 不同蔬菜之间亚硝酸盐含量硝酸盐含量的比较图4.（图2-3）各中蔬菜中亚硝酸盐含量及硝酸盐含量的比较从（图2-3）可以看出，伊宁恰玛古中亚硝酸盐含量是最高1.1294(mg/g)，最低是柯坪恰玛古0.5174(mg/g)硝酸盐含量之间差异也显著伊宁恰玛古中硝酸盐含量是最高2.5308 (mg/g)，最低是柯坪恰玛古0.0317(mg/g)3.讨论3.1亚硝酸盐含量结果讨论采用分光光度法对蔬菜中亚硝酸盐及硝酸盐的含量进行测试分析，方法简便，快速，准确，专一性好，试验结果得到各地区之间含量存在着显著性差异蔬菜中的亚硝酸盐，硝酸盐主要来源是人类活动，如：农药，化肥，生活排污的会产生亚硝酸盐及硝酸盐的土地污染最直接的危害是不利于植物生长，导致农作物减产乃至绝收，严重污染的土地可能寸草不生不仅如此，有毒物质被植物吸收积累后，通过食物链又进入人体，并在人体内富集，极有可能使人中毒。
亚硝酸盐对人、畜的危害：亚硝酸盐是氮循环的中间产物，其性质不稳定，它是一种公认的致癌性污染，亚硝酸盐可形成致癌物亚硝胺，危害人畜的生命健康所以亚硝酸盐超标会对食物链造成影响，影响人体健康4. 总结根据实验测定的结果以及数据分析，能大致得出以下结论：（1）亚硝酸盐：六种蔬菜中亚硝酸盐含量有明显的差异，测定结果是：大白菜0.7919mg/g，黄萝卜0.6930mg/g，黄瓜0.5763mg/g，拜城恰玛古0.5528mg/g，伊宁恰玛古1.1294 mg/g，柯坪恰玛古0.5174mg/g2）硝酸盐：大白菜1.6098mg/g，黄萝卜0.0598mg/g，黄瓜0.7421mg/g，拜城恰玛古0.2608mg/g，伊宁恰玛古2.5308mg/g，柯坪恰玛古0.0317mg/g，蔬菜中亚硝酸盐含量的回收率88.80%这些有助于我们更深一步的了解含亚硝酸盐的蔬菜消费过多时造成的一些不良后果，亚硝酸盐含量消费过多时，体内又缺乏维生素C的情况下，有强烈的致癌作用，主要引起食管癌，胃癌，肝癌和大肠癌等日常膳食中的亚硝酸盐不会对人体造成危害，只有过量摄入才能有毒性作用以上试验结果更合理的提供蔬菜消费可靠实际的依据，这些还表明该方法操作简便快速,灵敏度高,选择性和重现性好,干扰少,是检测水果中亚硝酸盐的好方法。
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