柴胡胶囊的制备摘要：目的：了解新药药学研究的内容及要求；了解实验设计的基本方法；重点掌握提取工 艺中的正交试验方法；了解研究性论文撰写方法方法：按照新药研究设计柴胡胶囊的制备 工艺结果：通过正交试验方法确定了第五组实验方案结论：通过正交试验确定了柴胡胶 囊的制备工艺，进行了标准检验关键词：柴胡；胶囊；优化；柴胡，为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根是常用解表药，性味苦、微寒，归肝、胆 经有和解表里，疏肝升阳之功效用于感冒发热、寒热往来、疟疾、肝郁气滞、胸肋胀痛、 脱肛、子宫脱垂、月经不调现有柴胡颗粒冲剂等剂型为主要治疗药剂，为方便携带和便于 吸收的原则，将制备较高品质，发挥良好药效的柴胡胶囊1. 实验材料与试验方法1.1实验材料与器具1.1.1实验材料：柴胡30g，乙醇（药用），乙醇（分析纯），5%亚硝酸钠溶液，10%硝酸 铝溶液，10%氢氧化钠溶液、可溶性淀粉、糊精、蒸馏水、醋酸钾、氯化镁、碳酸钾、漠化 钠、氯化钠、氯化钾、硫酸钾1.1.2实验器具：电热套与圆底烧瓶（1000mL）、冷凝管（每室一套正交实验器具）、电磁 炉若干、蒸发皿，水浴锅，天平，移液管（5mL, 1mL），容量瓶（25mL、10mL）、紫外 分光光度计（石英比色皿）、颗粒筛、搪瓷方盘、烘箱、空胶囊、胶囊分装器、干燥器、崩 解仪。
1・2.提取工艺研究1.2.1.提取工艺单因素考察取柴胡药材30g，加60ml水润湿，加一定浓度的乙醇，回流提 取，过滤，合并滤液即得1.2.2工艺优化乙醇浓度70%，采用正交设计，乙醇为溶剂回流提取，总黄酮含量与浸出 物得率为评价指标1.2.2.1评价指标的测定（1） 总黄酮含量测定：对照品溶液的配制：精密称取干燥恒重的芦丁对照品适量，用60%乙醇溶解并定容得到浓 度为0.4mg/ml的对照品溶液线性关系的考察：精密吸取0.4mg/mL的对照品溶液0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、 5.0mL置于25mL容量瓶中，分别加浓度为60%乙醇溶液至10mL，再依次加入0.5mL 5%亚 硝酸钠溶液，摇匀，放置6min后加入10%硝酸铝溶液0.5mL,摇匀，放置6min后加入10% 氢氧化钠溶液2mL，再加入60%乙醇定容，摇匀，放置15min后在波长504nm处测定吸光 度值求回归方程、相关系数和线性图样品测定：精密量取对照品溶液1.0ml，5.0ml，提取液？ ml，置于25ml容量瓶中，分别加 60%乙醇溶液置10ml，再一次加入0.5ml，5%亚硝酸钠溶液，摇匀，放置6min后加入0.5ml 的10%硝酸铝溶液，摇匀，放置6min后加入10%氢氧化钠溶液2ml，再加入60%乙醇定容， 摇匀，放置15min后在504nm处测定吸光度值。
按外标两点法计算得到标准曲线2） 浸出物得率测定精密称取浸膏适量（相当于药材1g），置已干燥至恒重的蒸发皿中， 在水浴上蒸干后，于105r干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量除 另有规定外，以干燥品计算浸出物的得率（%）1.3.浓缩、成型工艺研究浓缩、制粒、干燥、整粒1.3.1胶囊的填装 以药液和辅料（淀粉、糊精为赋型剂，1： 1的比例加入）1： 2的比例进 行制粒，干燥，整粒，填充于空心1号硬胶囊（g/粒）中1.3.2临界相对湿度测定含义：相对湿度增大到一定值时，吸湿量急剧增加，一般把这个吸湿量开始急剧增加的相 对湿度称为临界相对湿度（Critical Relative Humidity，CRH），CRH是水溶性药物固定的特 征参数临界相对湿度测定方法一般分两步：第一、制作吸湿曲线：称取药物（粉末或颗粒）1g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中（厚 约1〜2mm），干燥至恒重，精密称定，打开瓶盖，置盛有浓硫酸溶液（相对湿度75% ）的 玻璃干燥器中，于25°C的恒温箱中保存，分别于2、4、8、12、24 （h）……或其他时间段 取出称量瓶，精密称定，计算吸湿百分率，以吸湿率对时间作图即得到吸湿曲线，找到吸湿 平衡时对应的时间T小时。
第二、CRH的测定：称取胶囊内容物1g 7份，同上操作，分别置盛有不同浓度的浓硫酸 溶液的玻璃干燥器中，于25C的恒温箱中保存T （暂定7）天，取出称量瓶，精密称定，计 算吸湿百分率，以吸湿量对相对湿度作图的吸湿平衡曲线，在拐点作两切线，切线焦点对应 的相对湿度，即为CRH1.4质量标准研究1.4.1检查1.4.2崩解时限 取供试品6粒，装入吊篮中，将吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上， 浸入1000ml烧杯中，并调节吊篮位置使其下降时筛网距烧杯底部25mm，烧杯内盛有温度 为37C + 1C的水，调节水位高度使吊篮上升时筛网在水面下15mm处硬胶囊应在30分 钟内全部崩解如有1粒不能完全崩解，应另取6粒复试，均应符合规定1.4.3装量差异除另有规定外，取供试品10粒，分别精密称定重量，倾出内容物（不得损 失囊壳），硬胶囊囊壳用小刷或其他适宜的用具拭净；软胶囊或内容物为半固体或液体的硬 胶囊囊壳用乙醚等易挥发性溶剂洗净，置通风处使溶剂挥尽，再分别精密称定囊壳重量，求 出每粒内容物的装量每粒装量与标示装量相比较（无标示装量的胶囊剂，与平均装量比较）， 装量差异限度应在标示装量（或平均装量）的士 10%以内，超出装量差异限度的不得多于2 粒，并不得有1粒超出限度1倍。
1.5含量测定一一紫外分光光度法测定柴胡胶囊中总黄酮含量1.5.1溶液的制备（1）对照品溶液的制备（2）供试品溶液的制备：精密称取胶囊内容物0.1g，至50ml具塞三角烧瓶中，精密加入60%乙醇25ml,称重，超声 提取45min,再称重并补足60%乙醇量，过滤，即得1.5.2方法学（1）线性关系的考察精密吸取 0.4mg/mL 的对照品溶液 0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL 置于 25mL 容量瓶中，分别加浓度为60%乙醇溶液至10mL，再依次加入0.5mL 5%亚硝酸钠溶液，摇 匀，放置6min后加入10%硝酸铝溶液0.5mL,摇匀，放置6min后加入10%氢氧化钠溶液2mL， 再加入60%乙醇定容，摇匀，放置15min后在波长504nm处测定吸光度值以测得的响应信号作为被测物浓度的函数作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性 回归列出回归方程、相关系数和线性图2）精密度 取同一浓度的供试品溶液，在波长504nm处测定吸光度值，重复测定6次计 算标准偏差、相对标准偏差或可信限⑶ 重现性 取胶囊内容物5份，分别制备供试品溶液10ml，对照品溶液1.0ml, 5.0ml置于 25ml容量瓶中，分别加60%乙醇溶液至10ml，测吸光度，用外表两点法计算含量，求RSD.⑷ 稳定性 取同一份供试品溶液，分别于0min、10min、20min、30min、40min进样，测定 吸光度。
⑸ 加样回收率精密称取胶囊内容物0.05g 5份，按分别加入对照品0.3mg，按“含量测定 供试品溶液的制备项下制备供试品溶液，按“重现性“项下测定含量3.2.3样品测定精密称取胶囊内容物0.1g 2份，按“含量测定供试品溶液的制备“项下制备 供试品溶液，按“重现性“项下测定含量2. 实验结果表1因素-水平表因水平素A （固液比）B （提取时间， min）C （提取次数）D （空列）11:630121:945231:12603表2 L9（34）正交表NoABCD总黄酮含 量（mg）浸出物得率（%）综合结果（%）111110.5304.1427.665212221.1804.9046.464313331.0806.4749.484421230.6904.6133.284522312.8206.7393.586623120.7703.6031.730731321.1605.6848.701832131.1206.0448.970933211.7608.5673.688I123.613109.650108.365194.940II158.601189.020153.436126.895m171.358154.902191.771131.738RJ47.74679.36983.40668.045SSJ407.3971056.8021161.940960.898总和453.572平方和26445.674CT22858.638SS总3587.036通过正交试验确定柴胡胶囊的工艺为第五种方法。
表3方差分析方差标号离均差平方值自由度方差F值A407.3872203.6981.000B1056.8022528.4012.594C1161.9402580.9702.852D960.8982480.4492.359P0.05（2, 2）=19Pooi（2, 2）=990.01实验结果经直观分析、方差分析获得最优提取条件在45分钟，270ml乙醇量提取3次的 实验条件下，获得最高总黄酮含量，为最优提取条件但是由于实验时间有限，故将提取次数减少为2次表4临界相对湿度饱和溶液RH%称量瓶重(g)样品重(g)初始重(g)7天后重(g)平衡吸湿事(g)f 一、一 、，、 吸湿率(%)醋酸钾2329.72761.000130.728230.84800.119811.98%氯化镁3329.00931.000430.009730.10070.09109.10%碳酸钾4329.65731.000130.657330.73430.07707.70%漠化钠5927.96060.999928.960429.08270.122312.23%氯化钠7529.34171.000230.341930.48050.138613.86%氯化钾8533.65641.000134.656434.84600.189618.96%硫酸钾9827.68730.999828.687128.93260.245524.55%崩解时限：为5分钟/6粒，符合标准表5装量差异：序号质量(g)平均值(g)差值百分比10.350.0164.37%20.380.0143.83%30.390.0246.56%40.340.0267.10%50.360.3660.0061.64%60.360.0061.64%70.360.0061.64%80.390.0246.56%90.360.0061.64%100.370.0041.09%符合标准表6线性考察线性考察(对照品0.4mg/ml)序号对照品体积(ml)浓度(mg/ml)吸光度1000210.0160.188320.0320.369430.0480.556540.0640.734650.0800.908线性方程0. 1000. 0800. 0600. 0400. 0200. 000吸光度通过对样品的线性考察，发现被测物浓度的函数关系呈线性关系。
表7重现性序号重量(g)浓度(mg/ml)总黄酮含量(mg)吸光度百分比stedvaverageRSD10.50710.06609320.65406250.7554.07%0.0017292730.0436472783.9619%20.49780.0695484 21.7338750.7944.37%30.49750.0699914 21.87231250.7994.40%40.50660.0728266 22.75831250.8314.49%50.50990.0733582 22.92443750.8374.50%通过重现性实验发现在不同测量条件下，被测物的测量结果差异不大，故符合规定表8加样回收率黄酮含量(mg)颗粒质量对照品量吸光度回收量(mg)回收率(%)平均回收率 _..pv RSD(%)(g)(mg)(%)10.471621910.25717.30.70119.1589375119.00%115.58% 0.079258346 6.8576%11.002283050.25207.30.70819.35275114.39%11.281277160.25667.30.70219.186625108.29%11.298293710.25157.30.70419.242108.82%11.410516250.25387.30.75720.7094375127.38%通过加量回收率实验的测定，反映了测试结果的准确性。
符合标准表9精密度序号吸光度stdevaverageRSD10.56020.56030.5600.0005477230.5610.0977%40.56150.56160.561通过实验结果计算相对标准偏差小于1，故精确度符合标准表10稳定性序号质量(g)时间(min)吸光度stedvaverageRSD100.7810.0116619040.8001.4577%2100.80730.5005g200.8104300.8055400.797通过稳定性实验结果可以看出在在不同时间的样品吸光度之间的差异性不大。