不同刺激强度、频率以及药物对骨骼肌收缩的影响：王铭达 学号：1701190009 班级：临床二系1班一、 实验目的1. 观察不同刺激强度对肌肉收缩的影响，掌握阈刺激、阈上刺激和最大刺激的概 念；2. 观察不同刺激频率对肌肉收缩的影响，从而了解单收缩、不完全强直收缩和完 全强直收缩的概念和机制二、 实验材料1. 实验仪器及设备:BL420生物采集系统；力换能器；蛙类手术器械;锌铜弓；铁支 架;肌动器（肌槽）2. 实验动物：蟾蜍3. 溶液： 任氏液，普鲁卡因，琥珀胆碱三、 实验方法和步骤（一）蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本制作1. 制备完整的神经肌肉标本①破坏脑和脊髓②剪除躯干上部和脏④清洗器材，更换手 套 ⑤分离双后肢 ⑥分离坐骨神经⑦分离腓肠肌⑧游离坐骨神经腓肠肌标本 ⑨检测标本兴奋性注意事项：1. 在实验操作过程中，勿使金属器械触碰坐骨神经干； 2. 分离 神经时，一定要把周围的结缔组织剥离干净； 剪肌肉时要分层剪； 3. 注意安 全，避免蟾酥溅入眼；避免污染）2. 将标本固定在肌动器（肌槽），连接力换能器肌动需｛换能瞎—结扎线与桌面垂宜I坐骨神经腓肠肌标本连线不宜衣紧或太松r保持有一定的前负荷3. 打开电脑，进入生物机能实验系统实验项目一①刺激强度与反应的关系②刺激频率与反应的关系二）观察刺激对腓肠肌收缩的影响1.观察不同刺激强度对腓肠肌收缩的影响给予神经最小的单刺激后，观察肌肉是否收缩，若未收缩则逐渐增加刺激 强度，找出刚好能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度（阀强度）。
不断增加刺激 强度，观察肌肉收缩强度和刺激强度的关系，找出刚好能引起肌肉出现最大收缩 的最小的刺激强度，即最大刺激强度2.观察不同刺激频率对腓肠肌收缩的影响收蝎幅度“ IJ__■・■单收腐 不宪全强直收端 完全豪夏收第剌激模式采屈自动频率调节，虽定刺激强度不变［只改遞顷率选用最大刺激强度的连续刺激，其频率按照既定的幅度逐渐增加，分别记 录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不同 频率刺激时的肌肉收缩曲线的变化，从而引导出单收缩，不完全强直收缩和完全 强直收缩三）观察药物对肌肉收缩的影响1. 观察普鲁卡因对腓肠肌收缩的影响使用洁净干燥的棉花少许，使用普鲁卡因将其浸润后，让沾湿的棉花包裹坐 骨神经后开始试验其刺激强度应大于其最大刺激强度，其作用频率应使肌肉 展现出单收缩的状态2. 观察琥珀胆碱对腓肠肌收缩的影响使用洁净干燥的棉花少许，使用琥珀胆碱将其浸润后，让沾湿的棉花包裹坐 骨神经后开始试验其刺激强度应大于其最大刺激强度，其作用频率应使肌肉 展现出单收缩的状态注意事项：1. 实验过程中经常用任氏液湿润标本，以防干燥，避免污染；2. 股骨不可保留过短，否则标本不好固定；3. 分离神经须用玻璃分针，不能用金属器械；4. 避免过长时间地连续刺激标本，以防标本疲劳。
1.不同刺激强度对腓肠肌收缩的影响实验结果图由图可得阈刺激强度为0.250V，最大刺激强度0.310V2.不同刺激频率对腓肠肌收缩的影响实验结果图宝 OOOV. j Q He. 3e2.tXKT. S- D He. 15 =rrnniEnm m iirrnrnrnininHiE.MJV.. ID DHr.弓Du四、 实验结果••IlCC I2 COJ由图得当刺激频率为1Hz时引起单收缩，6Hz时引起不完全强直收缩，20Hz 时引起完全强直收缩3. 普鲁卡因对坐骨神经-腓肠肌标本收缩的影响在远高于最大刺激强度的刺激下，肌肉的力大小远小于没有普鲁卡因作用时4. 琥珀胆碱对坐骨神经-腓肠肌标本收缩的影响LL-L6 --SO -在远高于最大刺激强度的刺激下，肌肉的力大小远小于没有琥珀胆碱作用时五、 讨论1. 不同刺激强度对骨骼肌收缩有何影响？为什么？肌肉组织是可兴奋组织，受到刺激后会产生动作电位，表现为肌肉收缩腓 肠肌的收缩是由支配它的坐骨神经兴奋引起的，坐骨神经末梢和腓肠肌靠近处形 成神经-肌肉接头当刺激坐骨神经-腓肠肌标本时，动作电位（电信号）传导到 坐骨神经末梢，触发接头前膜Ca2+依赖性突触囊泡出胞，释放Ach至接头间隙（化 学信号），再由Ach激活终板膜中的N2型Ach受体阳离子通道，产生终板膜电位 变化（电信号）。
N2型Ach受体阳离子通道允许Na+，K+，Ca2+跨膜移动，但主要 是Na +流和K+外流°Na +的净流使终板膜发生去极化，这一电位改变称为终板电位 EPP属于局部电位，可以电紧的方式向周围传播，刺激邻旁普通肌膜中的电压门 控钠通道开饭，引起Na+流和普通肌膜的去极化；当去极化到阈电位水平即可爆 发动作电位，并传遍整个肌细胞膜单个骨骼肌纤维对剌激的反应具有全或无的性质，蟾蜍腓肠肌含有数目众多 的肌纤维，它们的兴奋性不同，因此不同的刺激强度可引发不同的肌肌收缩程度 当刺激恰能引起其中兴奋性较高的神经纤维产生兴奋时，部分肌纤维幵始发生收 缩，此时的刺激强度为阈强度（约50mV）,图像出现第一次波峰；当刺激强度 增加到某一值时，腓肠肌中所有的纤维均兴奋，此时肌肉产生最大的收缩，此时 的刺激强度为最大剌激强度（约95mv）此后的图像波峰趋于极值此后，若 再继续增强剌激强度，肌肉收缩反应不再继续增大2. 不同刺激频率对骨骼肌收缩有何影响？为什么？当剌激强度保持在100mV时，腓肠肌肌在受到一次剌激后，可以产生一次等 收缩，收缩过程可分为收缩期和舒期随着刺激频率的增高，各次刺激引起的收 缩 过程发生融合而叠加起来，体现为频率总和，指提高骨骼肌收缩频率而产生 的叠加效应。
这时肌肉强直收缩产生的力大于单收缩，这可能与连续刺激肌肉时， 从肌质网重复释放的Ca2 +浓度，使横桥得以有较长的时间持续活动有关当剌激 处动作电位频率为1 Hz，每次动作电位之后出现一次完整的收缩和舒过程，这 种收缩形式称为单收缩当剌激处动作电位频率为8Hz，后一次收缩过程叠加 在前一次收缩过程的舒期，所产生的收缩总和为不完全强直收缩当剌激处动作 电位频率为2 2Hz，后一次收缩过程叠加在前一次收缩过程的收缩期，所产生 的收缩总和为完全强直收缩， 此时波形的最高力处于水平，即等收缩极限3. 兴奋是如何通过神经-肌接头处的？如果刺激直接施加在肌肉上会出现什么现 象？运动神经末梢动作电位（电信号），触发接头前膜Ca2+依赖性突触囊泡出胞， 释放Ach至接头间隙（化学信号），再由Ach激活终板膜中的N2型Ach受体阳离 子通道，产生终板膜电位变化（电信号）N2型Ach受体阳离子通道允许Na+，K+， Ca2+跨膜移动，但主要是Na+流和K+外流Na +的净流使终板膜发生去极化，这一 电位改变称为终板电位EPP属于局部电位，可以电紧的方式向周围传播，刺激 邻旁普通肌膜中的电压门控钠通道开饭，引起Na+流和普通肌膜的去极化；当去 极化到阈电位水平即可爆发动作电位，并传遍整个肌细胞膜。
如果刺激直接施加在肌肉上且达到阈刺激时,肌肉上的电压门控钠通道激 活，钠离子流，肌膜去极化，引起兴奋-收缩偶联，肌肉收缩阈下刺激时，肌 肉不收缩六、 实验结论骨骼肌收缩存在阈电位当其刺激强度未达到阈电位时肌肉不收缩；达到阈电位 后骨骼肌收缩强度随刺激强度增强而增强，但当刺激强度达到一定大小时，骨骼 肌收缩强度不在变大不同的刺激强度使得骨骼肌收缩结果不同，低频刺激使得骨骼肌产生单收 缩，随着刺激频率的上升，骨骼肌由不完全强直收缩变成完全强直收缩药物普鲁卡因和药物琥珀胆碱对神经动作电位的产生有抑制作用，能降低 肌肉的肌力大小七、 实验反思 在实验过程中，制作的蟾蜍腓肠肌标本只有一组能够进行接下去的实验，在经过 对失败分离的标本观察和对剥离过程的反思后，认为在剥离过程中存在有不当操 作使神经部分机械受损在以后的实验中应该小心对待实验材料普鲁卡因的传导麻醉作用琥珀胆碱的骨骼肌松弛作用：高杰 学号：1601190008 班级：临床二系 1 班一、 实验目的1.观察普鲁卡因的传导麻醉作用，分析药物作用机制 2.观察琥珀胆碱的肌松作用，掌握除极化型肌松药的特点及作用机制二、 实验材料1. 实验仪器及设备:BL420生物采集系统；力换能器；蛙类手术器械;锌铜弓；铁支 架;肌动器（肌槽）2. 实验动物：蟾蜍3. 溶液： 任氏液三、 实验方法和步骤1. 制备完整的神经肌肉标本2. 将标本固定在肌动器（肌槽），连接力换能器—结扎域衣面垂直|坐骨神经腓肠肌标本肌动需连线不宜太紧或太松，保持有一定的前负荷换能器3. 打开电脑，进入生物机能实验系统观察项目（1）普鲁卡因的传导麻醉作用 用含有普鲁卡因的棉条包裹坐骨神经 刺激参数：强度IV频率1Hz串长：4刺激神经1次/min观察麻醉起效时间，10min后记录结果（2） 琥珀胆碱的肌松作用1）用含有 0.5%琥珀胆碱棉条包裹神经刺激参数：强度IV频率1Hz串长：4刺激神经1次/min观察麻醉起效时间，10min后记录结果2）用含有 0.5%琥珀胆碱棉条包裹肌肉刺激参数：强度1V频率1Hz串长：4刺激神经1次/min观察麻醉起效时间，10min后记录结果四、 实验结果 普鲁卡因的传导阻滞作用：琥珀胆碱肌松作用：珈、IB ； 5乐 平均曲；s屜r"1— IL, k i 丨1 u . tJLi 4...... _jj 山..ll—*■+413 9.GE.五、 讨论1.分析普鲁卡因和琥珀胆碱作用机制（1）普鲁卡因的局麻作用 局部麻药普鲁卡因的作用是提高产生神经冲动所需的阈电位，抑制动作电位去极 化的速度，延长动作电位的不应期。
当药物作用于坐骨神经时,电极产生的神经 冲动几乎完全被阻滞,发生除极化的肌纤维不断减少,产生的总力很低,因此每次 脉冲发出时只能观察到微弱的力变化2）琥珀胆碱的肌松作用 琥珀胆碱为非竞争性肌松药,其分子结构与 Ach 相似，与神经肌肉接头后膜的胆 碱受体有较强亲和力，且在神经肌肉接头处不易被胆碱酯酶分解，因而产生于 Ach相似但较持久的除极化作用，使神经肌肉接头后膜的NM胆碱受体不能对Ach 起反应，此时神经肌肉的阻滞方式已由除极化转变为非除极化当药物作用于坐 骨神经时,大量神经-肌街头处于非除极化状态不能产生兴奋 -收缩耦联,产生的总力不断降低,骨骼肌松弛当药物被移除后,琥珀胆碱可被胆碱脂酶分解,因此 肌松作用逐渐消失,骨骼肌恢复力。